j*******d
发帖数: 8834 | 1 先声明几点：
1）女性不在被BS之列
2）年纪超过50的不在被BS之列
3）削球打法不在被BS之列
大多数业余的不在1-3之列的选择打长胶/anti不外几个原因：
1）NC+RZ，看不清旋转，无论接发球还是对方拉过来或搓过来，一律整不明白旋转强弱
，唯有寄托于长胶/anti把球糊弄过去
2）肾虚，跑不动，进攻也打不出来，没力量，没旋转，唯有寄托于长胶/anti让对方失
误，或给自己制造一板打死的机会
长胶/anti这个东西就好比修炼葵花宝典，牺牲了天下最大的乐趣最后发现还不如独孤
九剑。 |
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t*****c
发帖数: 201 | 2 关于用法和用量：
直接涂沫法：我几乎每天都会用，晚上洗干净脸，直接抹上一层，然后开始洗澡，洗完
澡再把胶洗掉，再正常护肤，非常简单省事。有时早上洗完脸也直接抹上一层，然后该
干嘛干嘛，想起来再洗掉（这个方法不太建议，其实最好还是没全干时洗掉的）
用花水泡纸膜再涂胶的用法：把纸膜丢进10ML左右的花水里，贴在脸上，再涂上一层厚
厚的胶，15-20分钟后洗掉。我比较懒，这个方法通常一周一至两次。
按以上的用法，一瓶1L的胶大概3-5个月用完。
原来在国内也用过一段时间，最近在这边也在用，不敢说有明显美白去斑的效果，但是
保湿镇静非常明显，我的皮肤润了很多，而且这个胶非常温和，我还没听到谁说用这个
面膜过敏。
我一直认为保湿是护肤的根本，皮肤太干，再好的营养和产品也难以吸收，这是我买这
个面膜的最大动力。。 |
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h**********r
发帖数: 671 | 3 以前好好的。接着几次跑胶小片段都有点弥散，不知道原因。左图是筛克隆时的双酶切
，质粒是按《分子克隆》的碱裂解法提的。右图借用别的lab的qiagen的试剂盒提的然
后双酶切。问题也可能出在loading dye上。按《分子克隆》配的6X,40% sucrose加上
两种染料。EB是直接加在胶里的。大家看看吧，多谢！ |
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j****x
发帖数: 1704 | 4 很久很久没做胶回收了，但是Qiagen的Qiaquick印象中还是不错的，得率应该在50%的
样子。其实胶回收得率的关键在跑胶而不在kit，各家柱纯化kit的效率基本都在90%以
上，但是很多时候一个样品从上胶到切下来就已经损失了50%甚至更多了。
不过QIAquick有个缺点，就是溶胶buffer的用量是3倍gel slice的体积，稍微大一些的
gel slice就得分好几次离心，这点很不爽，所以后来就换成Fermentas家的GeneJET，1
倍gel slice的体积的溶胶buffer，效率也很好，还便宜。 |
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s******y
发帖数: 220 | 5 转膜后，在page 胶的顶部（分子量大的蛋白部分）总是残留在膜上，下部很快就能弄
下来。
为什么会这样呢？
跑得是biorad的4-20%梯度胶，
我要看的一个目标蛋白正好还在有胶残留的那块，会影响下游的WB结果吗？ 用的那个
一抗本来就有点tricky，有这个残留的胶估计更讨厌了。
有什么办法能把膜弄得更加干净点吗？
谢谢。 |
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s******9
发帖数: 283 | 6 ladder开起来很好，排除了胶的问题，所以可能是样品的问题。可能性有1）样品中大
量的离子影响电场（比如出现明显的弯月带）；2）有离子结合在DNA上。简单方法就是
用pcr purification kit处理一下再跑胶。 |
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T**********t
发帖数: 1604 | 7 同家公司的胶的质量也会参差不齐的。其实自己配的胶，只要手熟，不比预制胶差，除
非一定要用梯度胶。
电压不要太高，100V就好了，空白lane也加loading buffer，试试看会不会好一些。另
外注意内电泳槽不要漏buffer。我用Biorad的电泳槽，用久了之后内电泳槽密封不好，
会漏液到外面，如果不注意，跑一半电流就断掉了。所以我都把内外的buffer加到液面
相平。 |
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s******s
发帖数: 13035 | 8 你是都跑不好，还是只有这个蛋白跑不好？
我以前一个糖蛋白，gradiant胶上根本就是smear，自己做的胶是一条带 |
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T**********l
发帖数: 12149 | 9 跑胶没有电生理累人
一个电生理，BENCH WORK断断续续的持续十几个小时。。。。当然纯工作时间也就是3
个小时最多，但是很麻烦，要等，等半天跑一会儿，等半天跑一会儿
艹他妈屄的 |
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发帖数: 1 | 10 留两个资深博后在lab,一个杀老鼠,一个养细胞。
剩下所有每人带一套跑胶盒、20块胶、移液枪、枪头回家跑胶。
我是负责杀老鼠的资深博后。全实验室300只老鼠本月都由我来负责杀。工作量极大。
好处是我们两个杀老鼠养细胞的博后本月老板给我们一人一百块的红包。 |
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l*b
发帖数: 5305 | 11 遇到好的长胶，谁会让你游刃有余，你一个下旋，人家一把拱，你直接就去捡球了。人
家把你挤在反手，人家突然撇你一个正手，跑得慢的，你怕是连球都够不着。
长胶手法繁杂，细腻难练，高手也少倒是真的。 |
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l****z
发帖数: 29846 | 12 正胶直拍不能退台,退台基本死了.反胶的还可以跑着拉弧圈,正胶就不行了. |
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l****z
发帖数: 29846 | 13 正胶直拍不能退台,退台基本死了.反胶的还可以跑着拉弧圈,正胶就不行了. |
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t*****c
发帖数: 201 | 14 抱歉让大家久等了。
昨天才从外地回家，20号就寄到了，家里没人，又退回邮局了。
今天欢天喜地跑到邮局取了出来，一大箱重得要命，赶紧通知住得近的朋友来拿，两人
满怀期待打开箱，差点不敢相信自己的眼睛，裂开的芦荟胶洒得满箱都是，箱子有一半
是空的，泡沫没塞满，产品全部东倒西歪，还沾着洒出来的芦荟胶和花水。。。郁闷到
了极点，弄回家一一仔细检查，发现有四个1L的芦荟海藻胶、1个500ML的玫瑰花水裂开。
我刚拍了照片，发了邮件给BF，考古别人组团的贴子，应该是可以补回的，只是似乎非
常慢。。。
唉，当个小团长居然这么不容易。。。 |
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r*******g
发帖数: 32828 | 15 跑各种DNA。 话说生物现在还是怎么落后的跑胶， 就不能电子扫描吗？ |
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M*****n
发帖数: 16729 | 16 如果是每天跑十几块胶的，买现成的恐怕很费钱哦，除非大老板，小老板负担不起的。
如果每天一两块胶，还是买现成划算。你每小时的人工就超过一块胶了。 |
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C*******e
发帖数: 4348 | 17 连ladder都这样
我觉得是胶过期了
bio-rad的胶上面写的有效日期要注意
过期一两天没事
久了的话你再怎么折腾也跑不出来好胶的 |
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a*****n
发帖数: 2835 | 18 没有必要去除FLAG吧？跑到胶里面自然就跑出去了
样品不浓缩试试？样品太粘的话说明蛋白浓度过大
bait
10% |
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y*********o
发帖数: 38 | 19 跟正常SDS－PAGE胶跑法差不多，就是loading buffer中不加SDS，beta－Me，不用煮沸
样品。直接跑就行了，最好在四度跑胶。电压100v30min，150v35min 就差不多了。可
以用不重要的样品试试，很简单的。Good Luck。 |
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d*******e
发帖数: 110 | 20 最近一直在做WESTERNBLOT检测蛋白的表达，目的蛋白会形成一个五聚体，大小在60KDa
左右。电泳上样的时候没有煮沸变性，跑完电泳发现目的蛋白在40KDa的地方（和上样
的MARKER比较），少了20多KDa， 尝试用native-PAGE 胶跑电泳，但是条带size一下子
又很大了（和上样的MARKER比较），偏差很大，还不如SDS-PAGE胶。请问站内的高手是
怎么解决这个问题的？有构象的蛋白跑SDS-PAGE电泳size 不准确了。 |
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f*****r
发帖数: 3 | 21 最近有个实验， 让一个蛋白载上不同长度的脂肪酸， 然后用UREA-PAGE 分辨出来。参
考文献只有胶的浓度（16％），具体的配胶方法，以及电泳液的成分都没有 (含尿素吗
？）。查了其他的文献， 都是有关UREA-PAGE 跑DNA或RNA的。有人用UREA-PAGE 跑过
蛋白吗或知道相关的实验吗？还有，上样液用什么？非常感谢！
http://www.jbc.org/content/280/2/1669.long fig7 |
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v********a
发帖数: 646 | 22 各位，我各种PAGE胶都跑过，什么native PAGE, Urea PAGE， SDS-PAGE。
蛋白质电泳，我都是用的Invitrogen Gradient gel
跑电泳之前，我都是用DPBS洗洗wells
我会用一点loading buffer pre-run 10分钟
自己感觉细节都注意到了。但是就是不明白为何跑不好。
最近在分离一个RNA结合蛋白，需要很高的分辨率，才能截获目的RNA。
多谢路过解答的各位。 |
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x********e
发帖数: 35261 | 23 你们DNA胶回收都用的什么kit啊？效率如何？
我需要回收的DNA size在3-10kb间。我酶切2ug，跑胶（1%）回收。切下来胶质量大概1
00~200mg。
实验室有QIAGEN的kits。我试了QIAquick（旧kit），完全回收不了DNA。QIAEX II（全
新kit） 大概能回收500~800ng。根本达不到说明书上说的recovery rate。这属于正常
情况吗？
在网上搜了下，貌似QIAGEN的胶回收产品口碑不太好。我现在打算试试其他公司的产品
，希望找到一款简单又省心的产品。请克隆经验丰富的各位推荐一下~ |
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x********e
发帖数: 35261 | 24 你们DNA胶回收都用的什么kit啊？效率如何？
我需要回收的DNA size在3-10kb间。我酶切2ug，跑胶（1%）回收。切下来胶质量大概1
00~200mg。
实验室有QIAGEN的kits。我试了QIAquick（旧kit），完全回收不了DNA。QIAEX II（全
新kit） 大概能回收500~800ng。根本达不到说明书上说的recovery rate。这属于正常
情况吗？
在网上搜了下，貌似QIAGEN的胶回收产品口碑不太好。我现在打算试试其他公司的产品
，希望找到一款简单又省心的产品。请克隆经验丰富的各位推荐一下~ |
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f*******n
发帖数: 141 | 25 理论上产物各有多长？会不会是长链跟短链退火结合到一起，跑胶长度跟纯合长链差不
多？跑胶跑长一点，杂合与纯合应该会有差别。引物设计可能不够好。 |
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b***i
发帖数: 10018 | 26 ☆─────────────────────────────────────☆
AiUWa (Nemo妈) 于 (Tue Feb 28 14:53:48 2012, 美东) 提到:
上个礼拜左glute痛，休息。养了2天没感觉了。去跑步，左膝盖痛，决定休息一个礼拜
，其实才一天后就不痛了。但是我是小心出名的，所以继续养着。
书其实还没看完。看到一半的地方吧。
一些完全没有organize好的想法。
1. 在还没看书之前，测了一下平时easy long run的心跳。136-146之间。然后看书知
道怎么算MATHR.发现我如果take on LHR training的话。心跳要保持在134-144之间。
所以自己最舒服状态跑步差不多就是他建议的那样了。但是想想次次出门跑步都要像
easy long run的pace.没有speedwork,tempo, 难道不会很boring么？
2. 他说在build up aerobic base之前，任何anaerobic运动都会有坏影响。这点非常
turn me off.
3. 作者说用MAF办法，并且配合良好的饮食,压力控制好之类。... 阅读全帖 |
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K**********n
发帖数: 10466 | 27 老板说要不然连胶都不让我跑了。
还是工作要紧，等NIW下来再回来灌水。
2、3、4、5、6楼每人100。 |
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a****r
发帖数: 12375 | 28 re
老板说要不然连胶都不让我跑了。
还是工作要紧，等NIW下来再回来灌水。
2、3、4、5、6楼每人100。 |
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l*******1
发帖数: 16217 | 31 electrophoresis gel, 说白了就是跑电泳胶，分离 DNA, RNA, protein |
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l*******1
发帖数: 16217 | 32 超速离心分离是根据密度，溶解性不同分离，很多是粗分，
跑胶分是根据分子量和等电点分，细分，还能标识和记录 |
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s**********d
发帖数: 36899 | 33 跑胶的大多不是为了分离，而是鉴定识别。只有个别时候是分离切开再做下一步。 |
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c*9
发帖数: 3241 | 35 70伪币就告诉你。
发信人: haibugui (昵称太短！), 信区: Military
标 题: Re: 跑胶是啥意思？
发信站: BBS 未名空间站 (Thu May 7 13:33:56 2015, 美东)
75伪币就告诉你。 |
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w***u
发帖数: 17713 | 36 上买买提不知道跑胶，就算挖得一手好坑，也枉费了 |
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a**********u
发帖数: 28450 | 37 不是的，以前师弟们一起看A片的时候经常说哎呀真羡慕主角常常扣逼啊，锁男们都知
道。 结果师妹有次帮了我一个跑胶的忙，我说请客表示感谢，师妹笑着说不必。我说
你父母来了，正好我顺道表示一下，师妹有点小感动，看了我一眼说，那你可别太扣逼
啊。我心里面澎湃万千，面色依旧，一个晚上没睡着。 |
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w*********e
发帖数: 6093 | 38 走穴跑胶闯关东
出关下海过唐山
理科生没几根毛懂这些末路百姓的苦难史 |
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w*********e
发帖数: 6093 | 39 走穴跑胶闯关东
出关下海过唐山
理科生没几根毛懂这些末路百姓的苦难史 |
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w*********e
发帖数: 6093 | 40 走穴跑胶闯关东
出关下海过唐山
理科生没几根毛懂这些末路百姓的苦难史 |
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L*********s
发帖数: 3063 | 42 该跑胶跑胶，该杀老鼠杀老鼠，该刷管刷管
[在 Bluemusic (Bluemusic) 的大作中提到：]
：这里的码工，有谁正在参与一套新的语言的开发，用来彻底击败Java？你没本事开发
语言，为Java写个新的类库也行啊。
：
：........... |
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a**********u
发帖数: 28450 | 43 有道理。当初哥新婚后第二天去实验室在胶台上百感交集涕泗直流，世人都说１０年磨
１剑的艰辛，他们哪里晓得哥几十年候１炮的苦楚？！结果实验室的人们看到哥在哪里
哭，都远远地指指点点。哥杀老鼠多年耳聪目明，听到师弟们说麻痹不就是能放炮了吗
咋就能喜极而泣呢？丢人！师兄们不一样，笑声说唉，跟咱一样为了放炮把一辈子都搭
进去了能不哭吗？！师妹们比较温情，说男人啊为了个炮如醉如痴阿。师姐们非常粗俗
，说麻痹昨夜在家流精今天跑实验室流泪！哥在胶台上就很感慨，麻痹，同样一个炮，
每个人解读皆不同，想想，这可是说成炮的罗生门吧 |
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a******g
发帖数: 13519 | 44 码工还好说，整天上网，白天随便开一个显示器就能看比赛了。即使老板盯得紧，也可
以开个小窗口偷偷看。
千老剥尸猴怎么办？整天要杀老鼠跑胶，怎么看奥运啊！？ |
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s*****r
发帖数: 11545 | 50 I lu !
: 你是在跑胶吗，没有中文输入法
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