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t*d
发帖数: 8340 | 2 行了，别秀智商了。阅读障碍吧你？
美国银行是中国金融企业？
跑胶跑眼花了啊
[在 qianjin (前进) 的大作中提到：]
：刷过不少啊，还dispute过。美国银行把钱退给我了。根本没什么查录像之类的手续。
：虽然我没在中国申请过信用卡，可是看你说：
：........... |
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m*p
发帖数: 1331 | 3 胶跑的好，码写的快，jira close的多，事实证明了，这些metrics在资本主义社会，
木用。
我老这十年在东西海岸几家大公司呆过，亲身经历过好几次layoff。有一个team里勤奋
的老中好友被雷，抱着一个moving box，哭丧着脸过来我cubicle说，“我手机被停了
，我们qq联系。。。”
老中在美国大公司避免被首先layoff的几个招数：
1， 关键是要掌握一些核心的，让公司伤筋动骨的IP。老中大部分都是过来读ms，phd
的，搞这个跟喝水一样。比如，如果有patent正在pending，你跑出去加入竞争对手那
里，公司会损失很多。
2， 在layoff的时候，每个人都是麦肯锡这种management consulting firm写给cxo的
那个excel sheet上的一行。关键是不要冒头，换句话说，在你的title rank里面工资
最好不要最高，在你们team里面cost和pto不要剩下太多。免得到时候一排序，枪打出
头鸟。
大家集思广益。 |
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y**h
发帖数: 3093 | 6 跑完步，想着看到的白牛欲火无处发泄，在实验室撸出胶体 |
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s******y
发帖数: 17729 | 9 你个鸡巴跑胶跑晕了，这都是猴年马月的事儿了
这个复旦海归博士老公是交大的老师，当时两边挂着募捐媒体报道各种煽情，符合复旦
的一贯做法。 |
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发帖数: 1 | 11 生物索南专项，把dna放倒jelly里面跑，可以测大小 |
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发帖数: 1 | 12 我当年刚来当学生的时候, 和我死党一起出去找大保健, 结果开门迎客的是个40岁的大
婶, 想当年我才23, 24岁, 吓得我们两个立即转身跑了, 从此再也不对美国大保健有任
何幻想 |
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发帖数: 1 | 13 我嘲笑白牛跑胶跑的歪七歪八,结果她特生气
: 估计你怎么逗国妞乐也不会。不一定要讲笑话。开始可以自嘲自夸，熟了可以找
些不伤
: 对方自尊的话题故意嘲笑她。teasing是门技术
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发帖数: 1 | 14 文科生跑胶跑傻了
藏独也好疆独也好，本质都是分裂，分裂就是要反对
哪有什么闹和平分裂就可以支持的道理？ |
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z*****n
发帖数: 36 | 16 武汉党委：“我以为我们P4实验室的病毒早有疫苗了，毕竟论文都发表了，还有好几个
大funding支持，没想到啊没想到，高价引进的海归千老是个水货，写的论文都是假数
据，自己编的。只会杀老鼠跑胶，拿电镜给分子拍拍裸照。一查还是个菌斑老将，平时
没事就幻想对着白妞性艹。。。。。” |
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发帖数: 1 | 17 你的东西没带够，你告诉我跑胶还需要什么？ 知道了赶紧回去拿，明天就lockdown. |
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L****n
发帖数: 12932 | 18 傻叉跑胶跑得精分了吧， 我老从来不立碑坊。 十年前就在医版说过， 医生也没什么
特别， 有好的也有差的， 跟postdog一样， 有聪明的早早拿了卡转行的， 也有你这
号一路吃屎吃到棺材里的。 傻逼没救了。 |
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p******1
发帖数: 1388 | 19 以前我在北边一个学校的时候, 邻居有2个中国女生,还有街对面的一个中国女生, 先后
在来美国不到一年内分别买了车(其中一个女生的爸爸是个典狱长, 直接买了个新车),
但也都在不到半年内各自TOTAL了三个车: 成都女闯STOP没停跟老太太撞了(老太太开皮
卡, 否则又是一人命). 生物女毛毛细雨中傍晚赶着上实验室(据说是怕跑胶跑过了头),
车上了CURB(这也能TOTAL, 是因为那车是个DFBB里的小弟弟). 典狱长的女儿大白天边
开车边跟情夫打情骂俏, 追尾, 车头钻进了前车的屁股底下了, 她本人受伤不轻, 她LG
从上海赶过来看她我还见了一面聊了几句. 但情夫一事我没说,虽然校内老中基本都知
道这事. 看着怪可怜的一小帅锅.....绿帽子是铁定戴上了..
后来据说都3年过去了, 还是没一个再敢开车的.... |
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H*******n
发帖数: 436 | 20 07年我在实验室里做实验，在跑胶，跑电泳。。。 |
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S*******s
发帖数: 10098 | 21 有野性， 不知道哪天饿了，把主人肉也咬下来吃掉。
我们刚搬到郊区的时候还不知道有野生动物出来，邻居们警告我们了。
后来还真看见一只林中狐狸站那儿，夜里听见也狼狗叫，还曾见到一只老鹰站在我家院
子里的笼子上，笼子里关的是我家宠物小白兔宝宝，赶紧跑出去一看，草地上一团一团
的兔毛，被老鹰抓下来的。过了几年放松了警惕，我把小白兔放养在院子里随他跑，他
也知道从邻居家院子里串门后怎么回自己家， 可是某一天他就永久失踪了，所以邻居
才告诉我她的猫遇难的事情。 |
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o****p
发帖数: 9785 | 23 有些孩子就是喜欢跟精神病较真，人跑胶跑出臆症了，让他有个发泄的地儿，不要逼人
太甚了。 |
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x*********n
发帖数: 28013 | 24 半闭眼睛，按照脚步惯性跑，熬到25，基本发一个胶，吃完刚好冲刺 |
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s*******a
发帖数: 8827 | 25 每天4点钟交待他跑10个胶，跑完回家就可以了。 |
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c*******e
发帖数: 4642 | 28 伊run个SDS PAGE at low voltage 就出去吃午饭了。1个半小时以后回来，整块gel干
干净净，啥都没有留下。。。理论上，那么低的速度，能跑个一下午，伊捧着gel到处
问人。大家检查了gel solution,检查了她的power supply，都没有问题啊。让她做了
stain，的确啥都没有留下，也不是ladder问题。
正当大家围着那块gel埋头不语的时候（因为答案呼之欲出啊。。），阿拉老板大人慢
悠悠踱进来了，伸头一看，把大家都忍着没有说的一个可能性说出来了：侬那胶跑反特
了吧？？
伊瞪大眼睛看着老板，阿拉瞪大眼睛看着伊。。。。伊突然蹲在地上，大吼一声：son
of xxxxx!!!!
老板仰天长叹，耶稣啊，乌俄学生子哪能嘎瑞塔迪德。。。
阿拉跟围观群众就散了散了。 |
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T**********t
发帖数: 1604 | 29 理论上你可以这么干，不过没有FPLC土法上马的话，做起来很事倍功半。而且我没用过
动态光散射做检测器，不知道它的灵敏度够不够。也就是说如果蛋白浓度低的话，它能
不能测出来。紫外吸收的灵敏度是很高的。或者像前面有人说的，每个fraction都跑胶
看一下，就知道哪个有蛋白了。但是样品管多的话很麻烦。 |
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s******s
发帖数: 13035 | 30 有比我更加作坊的么？三年前为了纯化一蛋白，我label上了
S35, 然后搞了几根1ml的针筒拉掉推杆，装的柱子成本大概一
刀一根。size selection放射性蛋白mix, 室温手动收集fraction，
跑胶，压膜一个礼拜找蛋白。 |
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i********e
发帖数: 50 | 31 有个超大蛋白，单体为550Kda, 细胞里是tetramer。想看一下转基因表达后的状态，是
monomer/dimer/tetramer.请问除了native page还有什么方法能够鉴别或者比较
monomer/tetramer？
native page用了basic-native gel protocol。做western blot的话，使用的抗体和
monomer或tetramer结合的效果会有差异吗？比如monomer的结合效果好，band清晰。抗
体和tetramer 反应弱，看不大出来band?
比较奇怪的是，6％的胶跑3个小时和6个小时的结果不一样。难道6个小时后所有的蛋白
跑出去了？不应该啊.
求高人指点。 |
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s******y
发帖数: 28562 | 32 这个。。。关键是不纯的东西不好重复吧？
上一瓶和下一瓶的成分都不一样怎么搞？
还有，搞结构的实验室也得跑电泳啊，不纯的东西配出的胶跑出来没法看 |
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d******y
发帖数: 11545 | 33
thanks. 就是跑胶看一下,连western都不用做. |
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s********n
发帖数: 2939 | 34 PCR完没有跑个胶看看？最好看看得到的是不是你要的大小。 |
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i*S
发帖数: 175 | 35 我用的Pierce卖的梯度胶，然后sypro ruby染色。图是用机器扫出来的。用肉眼在
transilluminator上看也差不多。
能看见条带，可是lane里面背景太高，很不分明。特别是边缘像是smear了。请问大家
有没有什么主意？
我开始认为跑之前我没desalting，溶液里Na+ 和 Ka+ 大概都约500mM，有些高了，蛋
白分离的不好，于是用氯仿提纯了一下，好像没什么帮助啊……
PS: 下方黑块是怎么回事我也不清楚嗯 |
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g*********5
发帖数: 2533 | 36 实验室的俄国哥们今天又同时用一个电源跑16块胶... |
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s******y
发帖数: 28562 | 38 什么样品？用什么胶跑的？转到了什么膜上面？
你有没有用Ponceau S 染染看蛋白是否转过去了？
如果你的样品里有actin 的话，即使转膜不完全，不可能一点都看不到的，
如果什么都看不见，那就有几个可能：
1。 你的二抗坏掉了，或者你的WB reagnet 有问题。 这个是最有可能的。
2。你跑的样品根本就不是普通的真核细胞的样品。 |
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c********b
发帖数: 363 | 39 盐离子浓度如果不是很高的话你可以就用binding buffer跑胶试试。 |
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C*******e
发帖数: 4348 | 40 如果是想跑酸性条件下的非变性蛋白PAGE胶，可能结果更不理想
我找过两个方子，pH值略有不同
如果你真要试，回头到了办公室贴给你 |
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s******s
发帖数: 13035 | 41 跑胶电压大点也就一个小时，转膜一个小时，要注意效率！ |
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w***7
发帖数: 1637 | 42 我的point是,既然中美差距这么大,有得挑的时候,为啥不挑一个从高水平体制下培养出
来的?
多谢指点,不过本人花了不少力气,已经从basic research跳到临床了.虽然paper 还在
读,考试多了不少.不跑胶已经很长时间了. |
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w***7
发帖数: 1637 | 43 我的point是,既然中美差距这么大,有得挑的时候,为啥不挑一个从高水平体制下培养出
来的?
多谢指点,不过本人花了不少力气,已经从basic research跳到临床了.虽然paper 还在
读,考试多了不少.不跑胶已经很长时间了. |
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s******y
发帖数: 28562 | 44 30V， 4C，overnight对于无论是大蛋白还是小蛋白都比110V 跑几个小时出来的条带明
显的强很多。
对于中等大小的蛋白则差别不是特别大。
时间会长不假，就看你们更注重什么了。我们经常要做一些含量很低的蛋白，我的一个
博士后用他以前实验室的习惯用110V跑，得到的带非常模糊。我让他改成30V， 4C，
overnight，效果立马不一样。 |
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z****k
发帖数: 95 | 45 我见的MD PhD还都是跑胶跑出来，没见过那种数据的。不知道你你们医学院的resident
都是怎么打算的？ |
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t*****z
发帖数: 1598 | 46 你有所不知。我后来之所以会有装机（bi）的爱好，完全是怕代码敲太久，实验本领生
疏了，需要经常做点home hobby来保持灵巧的双手。我当年跑胶跑得可利索了。 |
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发帖数: 1 | 50 郝柏村忆述“八.二三”金门炮战
1995年秋，我到金门任第8炮兵指挥，同时兼任金门防卫司令部炮兵指挥官。当时
金门司令是刘玉章将军，也是沙场将，属于52军关麟征的系统。刘司令看似老粗，实则
心细，战场经验丰富，治军很严，做事踏实。他每日看部队，把所见记在小本子上，每
周开一次会报，首先检讨上次会报裁示执行情形，如该做而未做是过不了关的。他这种
务实的作风，对我尔后行事有很大影响。
打不破比打不着重要
我在金门，也是第一次追随刘玉章将军做事。刘将军到金门后，强调防卫工事的重
要。此际金门已经发生过“九三”炮战，偶尔亦有零星炮击。我到金门后，视察了所有
炮兵阵地，大都还是用砂包堆成的野战掩体，一门炮的掩体需一万个砂袋，每个砂袋3
元（台币，下同），便要3万元，而砂包经一年半载的晒夜露就破了，因此每个掩体一
年便需3万元的砂包费。金门是要长期固守的，这种消耗既不坚固又不浪费，所以我主
张构建钢筋水泥炮兵掩体。
当时金门已有美国顾问，他们认为炮兵阵地应该机动，不宜用固定掩体，部分“国
防部”幕僚也赞成顾问的想法。我认为金门幅员有限，而炮兵阵地密集... 阅读全帖 |
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