k*****r
发帖数: 21039 | 1 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: sanguan (不限), 信区: Military
标 题: 昨天晚上做了一个噩梦
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Nov 14 15:14:44 2014, 美东)
梦里依稀是三战爆发, 中美开仗, 老将欢呼,五毛沮丧. 结果美国鬼子把所有黄皮都关集
中营, 根据帖子内容甄别老将五毛, 是老将就编入带路党, 为美国大兵当向导, 如果你
是五毛那就只好在集中营里把牢底坐穿.
不一日, 老将凯旋, 有仇报仇有怨报怨, 都到集中营里面提审五毛, 五毛一片悲鸣, 本
五毛也被带进审讯室, 进来一个气宇轩昂獐头鼠目的老将, 一见面就狞笑着说: 听说过
民主杀全家么? 廊坊的五毛已经杀光了,现在轮到你们这些自干五了.
我当场吓了一个屁墩,哀嚎道: 同披一黄皮, 相煎何太极. 老将对我嗤之以鼻: 黄皮?你
他妈才是黄皮呢, 你们全家都是黄皮, 本大爷本来是白人,祖宗十八代都是白人, 后来得
了黄化病才成了黄皮, 就你还是千老呢, 连黄化病都没听说过, 该杀. 我赶紧就坡下驴
, 请您跟小人一个立功赎罪的机会.
老将低头看了看... 阅读全帖 |
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w********h
发帖数: 12367 | 2 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: bulletin (bulletin), 信区: Biology
标 题: 穷人的劳斯莱斯——五年western经验谈（转）
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Mar 2 23:29:05 2012, 美东)
1. 抗体的选择
对于国内的大多数实验室来讲，做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很
简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气，对于我所在的兰州地区
的实验者而言，感触尤深。在 这五年的western blot实验历程里，我先后用过进口抗
体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。
进口抗体一般不会出现闪失：abcam品种全，质量过硬，但价高（3400元/100微升），
而且说是100微升，但至多能吸出来90微升；Sigma的 价最贵；比较有性价比的是CST的
抗体，现在好像是2200元/100微升，我前后用过二十几种， 1:1000的稀释比下，还没
有失过手，100微升通常能完成所有的免疫组化和western blot实验，还有一个优点是
通常量比100微升多出来10... 阅读全帖 |
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m******r
发帖数: 9604 | 3 友情提示：比较啰嗦和枯燥。
#成绩#
总时间/3.8km游泳/180km自行车/42.2km跑步：
13:40:54/1:45:10/6:04:41/5:36:41
年龄组（男子35-39）第223（310人参赛）
总名次1525(2400人左右参赛)
2010的成绩:
16:37:54/1:43:53/7:37:20/6:56:14
年龄组229/238, 总名次2172/2361
进步还是挺大的。
#训练#
我在一年前就报了名参加比赛，可是真正的训练却是到了9月份才开始。在这之前我基
本上都在练习游泳，几乎没有进行骑车跑步的训练。虽然这次比赛的游泳时间比2年前
还要慢1分多钟，可是出水的时候我的疲劳感比上次明显小很多。这要归功于前半年在
泳池里打下的基础。从9月份开始，我用11周的时间进行了代号为‘每周一砖’的特训
（英文中brick training是指骑车后马上进行跑步的练习），每个周末都要安排一次骑
+跑的训练。距离从开始的50k+9k到后来的160k+13k不等。这些大大小小的砖头起了很
大的作用。在第8周我参加了一次半程铁人为大铁热身，发现水平提高了不少。于是在
最后几周... 阅读全帖 |
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w***n
发帖数: 9040 | 4 这次比赛的目标就是破130，结果跑出了1:29:59的官方成绩，简直太精准了，比跑了1:
29:00还开心，说出去都是1:29，都是破了130，嘿嘿
真是多一秒浪费，六十分万岁！而且给下次破纪录留了些余地。
从零基础开始跑步已经三年了。
这是第三次参加芝加哥半马，我的首半马就参加的这个比赛，组织的挺好，参与人数也
很多，参加半马的人数有13860人，5公里的有1463人。
历史成绩：
2011.09.11 Chicago Half Marathon是我的首半马
时间1:48:46 排名1635 of 11891 (13.7%）
2012.09.09 Chicago Half Marathon是我的第三次半马(替别人跑的)
时间1:35:25 排名546 of 12105 (4.5%)
2013.09.08 Chicago Half Marathon
时间1:29:59 排名188 of 13851 (1.4%)
因为这个半马是我10月份，芝加哥全马的热身赛，所以没有准备，还是按照原计划训练
（AP计划比较坑爹，天天跑，一个月就休息一天），赛前增加了一天休息而已。
比赛开始早晨7点的... 阅读全帖 |
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c**v
发帖数: 1936 | 5 短篇小说：刘厚明《阿城的龟》
==================
灵岩岛，在地图上不过是一粒砂。岛上却有个驰誉海南的珍贵动物保护区。今春，我出
差海南，也慕名拜访了灵岩岛上的动物王国。
那是一片幽深静谧的山林，活跃着大群大群的猕猴，矫健而温驯的坡鹿，羽色如虹的各
种鹦鹉，以及穿山甲、四脚蛇之类。龟，也是这动物王国的子民，当我在一块青苔斑驳
的卵石上，发现了这种爬行类动物时，瞥了一眼就要走：它们太不起眼了。
“等一等！”向导小黎却拉住了我。他上去把趴在卵石上的两只苍青色小龟，用手指挑
了两下，把它们挑翻过来。这时，我忽然眼前一亮――那两只龟的腹甲竟都是桔红色的
，灿然牛辉！
“啊！真漂亮！简直像红珊瑚！”我欢呼起来了，“小黎同志，这叫什么龟？”
“灵岩八板龟，我们岛子上特有的！”他不无自豪地说。又把那两只龟翻回来，“在我
们岛子上，还流传着一个关于这种龟的故事呢。”
“是吗？我倒想听一听。”我这时正有点儿累，也打算休息一会儿。
“可以呀！咱们坐下说。”他显然很乐意对我这个北京来的客人讲那故事。
我们在树荫下找到两块马鞍似的石头，相对而坐。接着小黎便给我讲了下面的故事――
关于一个孩子和... 阅读全帖 |
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wh
发帖数: 141625 | 6 【 以下文字转载自 LeisureTime 讨论区 】
发信人: cmmv (闲来垂钓碧溪上), 信区: LeisureTime
标 题: 【旧期刊】刘厚明 《阿城的龟》（全文转载，长，慎入）
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jul 31 20:15:54 2014, 美东)
短篇小说：刘厚明《阿城的龟》
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灵岩岛，在地图上不过是一粒砂。岛上却有个驰誉海南的珍贵动物保护区。今春，我出
差海南，也慕名拜访了灵岩岛上的动物王国。
那是一片幽深静谧的山林，活跃着大群大群的猕猴，矫健而温驯的坡鹿，羽色如虹的各
种鹦鹉，以及穿山甲、四脚蛇之类。龟，也是这动物王国的子民，当我在一块青苔斑驳
的卵石上，发现了这种爬行类动物时，瞥了一眼就要走：它们太不起眼了。
“等一等！”向导小黎却拉住了我。他上去把趴在卵石上的两只苍青色小龟，用手指挑
了两下，把它们挑翻过来。这时，我忽然眼前一亮――那两只龟的腹甲竟都是桔红色的
，灿然牛辉！
“啊！真漂亮！简直像红珊瑚！”我欢呼起来了，“小黎同志，这叫什么龟？”
“灵岩八板龟，我们岛子上特有的！”他不无自豪地说。又把那... 阅读全帖 |
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k*********2
发帖数: 4 | 7 是啊，我们实验室就用的SYBR safe，具体牌子没注意
非常方便啊，就是有些贵，好像一盒胶就十几二十个要快100欧元，明天去实验室看看
牌子和价格。
有一个小机器相当于电泳槽，胶是预制的一块块塑料板，各种浓度都有。
每次用的时候打开包装，把塑料胶板卡在小机器的槽上（不加buffer），去掉梳子直接
加DNA样品（不用加蓝），就可以跑了。跑的时候可以用它的uv背光直接看，跑得差不
多会自动终止（没有跑丢的危险，我喜欢）。拿板子直接照相，不会有水滴的到处都是
~~~~
最方便的是如果要回收DNA时不用胶回收试剂盒。有一种有两排上样孔的胶版，上面加
样下面加水，DNA快跑到下面那个孔时，用背光看着，当DNA跑进去的时候吸出来，真的
超方便，不小心跑过的话还能往反方向跑，哈哈
我们实验室是这个系统和传统的胶都用，这个虽然贵很多，但如果大家经常要胶回收的
话，用这个就省了回收试剂盒了。 |
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t*****g
发帖数: 7455 | 8 上午6:56（3 小时前）被社会忘却了的故事，被强奸女知青人数超过南京大屠杀从 人
人都是艺术家 作者：梁萧一个女知青麻木地推开生产队长家的门，一步一步、沉重万
分地走了进去。
生产队长的桌上摆着半瓶二锅头和一小盘花生米，还有一张招工表格和生产队革委会的
大樱
女知青站住了，双目无神，象一个被送上祭台的羔羊。
生产队长甚至连门都不关，闪闪烁烁的油灯都不吹，就粗鲁地笑着，一把扯开女知青的
衣衫，无耻地揉摸那还未完全发育成熟的乳房，然后把她推倒在充满汗味和臊味的木板
床上。
女知青没有喊叫，怕人听到，只是心和下体一同疼痛着。
当女知青从床上站起来，滞重地穿着衣服时，生产队长将血红的大印盖在了招工表上。
和那大印一样鲜红的还有床单上几块处女的血痕。
假如这仅仅是故事，是小说，那么，本文就没有任何存在的价值和意义了。
一九七二年，安徽某县首次由贫下中农推荐上大学，全县数万知青展开大规模竞争，最
终有七十余人获得这天大的幸运。在进行上学前体检时，妇科检查的医生惊讶地发现，
七名女知青没有一名是处女，而且几乎全都不是陈腐性裂痕。她们都是在招生通知发下
以后失去贞操的。
女知青们是以肉体为代价换得一... 阅读全帖 |
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m******5
发帖数: 1383 | 9 求教：
我在做一个做knock in mice用的大质粒（12k)
单酶切后是一条12k的线性化的带
但切胶回收后跑胶，12k的带变淡，却出现两条很浓的9k和6k的带。
实验室同学怀疑是star activity,但鉴于我跑的是切胶回收后产物，我怀疑是长质粒自
身缠绕形成的结构，跑得比较快
请教大家遇到过这种情况么？（再次强调酶切后跑胶只有一条带，6k和9k的带是胶回收
后跑胶时出现的） |
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T**********t
发帖数: 1604 | 10 你如果自己没有制胶的经验，不如买预制胶好了，效果比自己配的好太多了，还省事。
我自己制胶一般花40分钟左右，分离胶和浓缩胶一般10分钟就凝了，15分钟左右基本上
肯定凝得很好了，再加上前后准备的时间。
invitrogen的protein marker从3.5K到260K，应该很够用。cat #是LC5800或者LC5801
。其实protein marker都差不多，promega和fisher的我也用得挺好，就是没有那么小
的分子量，但做多了就知道自己的目标蛋白该跑在什么相对位置，毛估估也对付得过去。
一般我跑bio-rad的mini胶，用5%浓缩15%分离的话，常温跑160V恒压40分钟左右。如果
是预制胶，按照预制胶的说明书来就好了。
我不怎么做western blot，所以transfer的条件就不知道了。 |
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s*****g
发帖数: 7857 | 11 同样问题。
梯度胶也是有时小分子量跑不好。原因是开始灌胶时，高浓度和低浓度胶液没有匀速控
制好！
12%还行。
不过最近他们一年保质期的胶抽气保存。胶的质量就因为肉眼难以察觉的气孔而质量
下降（即使是12%胶也一样。）。--有时跑出来的带有（但是不匀）或没有（就想被用
抹布在某块抹了一下。。。）（不抽气的胶过保值期一年了，还质量很好。而抽气的胶
，出结果是撞大运，撞好了，就什么带都很好，撞不好就少几条带。。。）
他们的NC膜我们用大卷的，自己切割。质量和Themo的一样。Odyssey是用Bio-rad NC摸
本人更喜欢传统的胶片法。
没有量跑 |
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发帖数: 1 | 12 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: snowyday (买买提Fuckty), 信区: Biology
标 题: 川普砍经费，丐帮上下紧张
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Mar 19 09:30:17 2017, 美东)
自洪帮主创建丐帮以来，不知道啥时候又多出了一个分支，那就是我们杀耗子帮。表面
看，我们杀耗子帮和丐帮风马牛不相及，其实不然。我们也属于丐帮。
不用沿街乞讨，但是我们每天都在乞讨，千老和小帮众向长老们乞讨，长老们每天写gr
ant向袋子更多的长老乞讨，高级长老也需要向政府向国会乞讨......总之，我们延续了
丐帮的传统就是靠乞讨活着。
杀耗子的丐帮帮众大抵都是衣衫褴褛，趁打折时候囤的 5块钱一件的old navy穿了好几
年，洗的都出了棉纺本色还在穿。十年新的civic保养的好，没有划痕那就是体面的车了
，的资深千老才开得起，刚入行的帮众能倒腾个2000左右的烤肉啦开着，买菜不求人就
已经不错了。就算长老级别的帮众，也就开个爬坡王。
我们杀耗子帮其实也不全是杀耗子，小的从蚊子苍蝇，甚至线虫细菌都杀，大的杀兔子
猴子都不在话下，但是很多... 阅读全帖 |
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r****a
发帖数: 1212 | 13 不乏有才之人
[在 Sopranoss (黑子) 的大作中提到：]
:自洪帮主创建丐帮以来，不知道啥时候又多出了一个分支，那就是我们杀耗子帮。表
面看，我们杀耗子帮和丐帮风马牛不相及，其实不然。我们也属于丐帮。
:不用沿街乞讨，但是我们每天都在乞讨，千老和小帮众向长老们乞讨，长老们每天写
grant向袋子更多的长老乞讨，高级长老也需要向政府向国会乞讨......总之，我们延
续了
:丐帮的传统就是靠乞讨活着。
:杀耗子的丐帮帮众大抵都是衣衫褴褛，趁打折时候囤的 5块钱一件的old navy穿了好
几年，洗的都出了棉纺本色还在穿。十年新的civic保养的好，没有划痕那就是体面的
车了
:，的资深千老才开得起，刚入行的帮众能倒腾个2000左右的烤肉啦开着，买菜不求人
就已经不错了。就算长老级别的帮众，也就开个爬坡王。
:我们杀耗子帮其实也不全是杀耗子，小的从蚊子苍蝇，甚至线虫细菌都杀，大的杀兔
子猴子都不在话下，但是很多人误解，就觉得我们是杀耗子。大多数帮众也懒得去争辩
。别说弄死耗子好几种方法，我们弄死植物，弄死细菌都能比茴香豆的写法多得多。那
是他们的无知，比如跑胶，我们能横着跑，竖... 阅读全帖 |
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h******h
发帖数: 655 | 14 报告终于来了, 文章真的很啰嗦，而且为了照顾不跑步的朋友，有不少注释，请见谅。
又，文章发在FB上的，bbs没法排版，可能看起来比较困难。只想看比赛的直接跳到26.
2
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因为这次CIM意义重大，我再没有文笔也下决 心写一篇口水长文来总结来纪念一下我这
一年多的跑马之路，多少算是给自己一个交代。
全马的小火花
去年十月开始跑步，源于中年危机+妄想减肥（咳咳，肥不肥我说了算）。对于全马，
没有什么愿望，最多就是想如果能坚持，在40岁的时候能完成一个全马那应该是check
了一个很酷的bucket list（人生目标清单）。一开始报了今年一月的Carlsbad 半马，
训练跟的Runkeeper上的免费sub 2:15计划，不得要领，每次训练都是拼命的跑，很苦
很累，毫无乐趣可言。加上常常出差，时差倒得死去活来，现在也不明白当时是怎么撑
过来的。虽然比赛超过预期, 但是最后两迈几乎是崩掉的，跑完就想直接趴下，更发誓
赌咒再也不跑了。当... 阅读全帖 |
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r***u
发帖数: 1272 | 15 1、洁具买惠达和箭牌的。
2、华润的镜子质量好；
3、华航的五金便宜且质量较好；
4、加枫玻璃隔断（浴房）质量好。
5、法恩沙马桶好，都1000多。
6、换气扇最好装在烟道立面上，装在铝顶上会产生共振的。
7、地面找平和防水（包工包料）一般分别是15/平米和60/平米。
8、马桶的三大系列比较：漩涡比较静音；冲落是较传统的方式，费水；喷射较省水。
9、买洁具主要考虑的是它的节水性、外观及噪音，这几方面注意了就ok了！综合考虑
它的优、缺点，宁可买好品牌最便宜的也不去尝试杂牌最好的！这是购物的窍门。便宜
的可能是“不是时尚的”，但工艺及售后服务应该是相同的，只要实用就行。安装必须
找专业的工人来安装，以免影响使用性！水龙头也是一样。不好的龙头时间长了会自己
滴水或龙头内部生锈。建议在卫生间里做个台面（具备做台面的条件），这样你省老劲
了！五金件不益过多，那样会很乱又浪费钱，最好有个活动的置物架，加上台面，再有
个毛巾杆、马桶刷、纸巾架、浴巾架足够用了！可以在门后面买几个小的挂衣钩。建议
买五金件不要去建材市场购买，虽然便宜了一点，但是质量真的不敢保证！用久了不是
掉了就是生锈了！你换吧只... 阅读全帖 |
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s******y
发帖数: 17729 | 16 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: snowyday (买买提Fuckty), 信区: Biology
标 题: 川普砍经费，丐帮上下紧张
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Mar 19 09:30:17 2017, 美东)
自洪帮主创建丐帮以来，不知道啥时候又多出了一个分支，那就是我们杀耗子帮。表面
看，我们杀耗子帮和丐帮风马牛不相及，其实不然。我们也属于丐帮。
不用沿街乞讨，但是我们每天都在乞讨，千老和小帮众向长老们乞讨，长老们每天写gr
ant向袋子更多的长老乞讨，高级长老也需要向政府向国会乞讨......总之，我们延续了
丐帮的传统就是靠乞讨活着。
杀耗子的丐帮帮众大抵都是衣衫褴褛，趁打折时候囤的 5块钱一件的old navy穿了好几
年，洗的都出了棉纺本色还在穿。十年新的civic保养的好，没有划痕那就是体面的车了
，的资深千老才开得起，刚入行的帮众能倒腾个2000左右的烤肉啦开着，买菜不求人就
已经不错了。就算长老级别的帮众，也就开个爬坡王。
我们杀耗子帮其实也不全是杀耗子，小的从蚊子苍蝇，甚至线虫细菌都杀，大的杀兔子
猴子都不在话下，但是很多... 阅读全帖 |
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s******y
发帖数: 17729 | 17 自洪帮主的丐帮以来，不知道啥时候又多出了一个分支，那就是我们杀耗子帮。表面
看，我们杀耗子帮和丐帮风马牛不相及，其实不然。我们也属于丐帮。
不用沿街乞讨，但是我们每天都在乞讨，千老和小帮众向长老们乞讨，长老们每天写gr
ant向袋子更多的长老乞讨，高级长老也需要向政府向国会乞讨......总之，我们延续了
丐帮的传统就是靠乞讨活着。
杀耗子的丐帮帮众大抵都是衣衫褴褛，趁打折时候囤的 5块钱一件的old navy穿了好几
年，洗的都出了棉纺本色还在穿。十年新的civic保养的好，没有划痕那就是体面的车了
，的资深千老才开得起，刚入行的帮众能倒腾个2000左右的烤肉啦开着，买菜不求人就
已经不错了。就算长老级别的帮众，也就开个爬坡王。
我们杀耗子帮其实也不全是杀耗子，小的从蚊子苍蝇，甚至线虫细菌都杀，大的杀兔子
猴子都不在话下，但是很多人误解，就觉得我们是杀耗子。大多数帮众也懒得去争辩。
别说弄死耗子好几种方法，我们弄死植物，弄死细菌都能比茴香豆的写法多得多。那是
他们的无知，比如跑胶，我们能横着跑，竖着跑，还能转着圈儿变着相位的跑，那都不
是事儿。
我们杀耗子帮近年来也变化比较大。不都是... 阅读全帖 |
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C******y
发帖数: 3249 | 18 shi Yi gong 的直线思维是这样的：
读研，拿蛋白，发CNS
读博后，拿蛋白，发CNS
评青千，拿蛋白，发CNS
评杰青，拿蛋白，发CNS
评院士，拿蛋白，发CNS，发心灵鸡汤做人生导师
晓东王的直线思维是这样的：
读研，跑胶，发CNS
读博后，跑胶，发CNS
评青千，跑胶，发CNS
评杰青，跑胶，发CNS
评院士，跑胶，发CNS，发心灵鸡汤做人生导师 |
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c*********d
发帖数: 9770 | 19 裸嘢李 裸嘢李 微信号 gzh54446700
功能介绍
传播法律常识，解答法律咨询。
图文皆源自网络，图片上的水印@裸嘢李是微信公众号系统自动添加，并不代表@裸嘢李
对图文拥有版权。特此申明。
本帖转发了三个帖子：
之一：刘亚东：除了那些核心技术，我们还缺什么？
之二：光刻机、操作系统、芯片、PA等35项卡脖子技术，只是冰山一角！震撼！
之三：中国包揽德国抄袭奖前10名！还得了特设的“鬣狗奖”
无论你认为你的国或者我的国厉害了还是利害了，都值得好好读读冷静思考思考。
@裸嘢李
之一：刘亚东：除了那些核心技术，我们还缺什么？
6月21日下午，“是什么卡了我们的脖子 • 亟待攻克的核心技术” 科学传播沙
龙在中国科技会堂召开。科技日报总编辑刘亚东做了主题演讲，在详细介绍《科技日报
》“亟待攻克的核心技术”系列报道的出台背景和意义之外，还详细说明了在那些核心
技术之外，我们还缺的到底是什么？全文如下。
《科技日报》总编辑刘亚东
各位嘉宾、各位朋友、各位同事，下午好！
2018年4月16日，中兴事件的新闻在网上爆棚。三天以后，4月19日，《科技日报》一版
头条强势推出新专栏“亟待... 阅读全帖 |
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s*****r
发帖数: 11545 | 20 这早就不是什么秘密，也没有什么选择。
共匪成功策略：
(1) 测试隔离一切疑似并及时用药。
(2) 全民佩戴口罩并密切监视民众。
(3) 铁腕手段封闭省县市镇村小区家庭。
共匪成功要素：
(1) 还凑合的科技，骇人听闻的生产能力。
(2) 国民在小事上刁奸耍滑，在大事上温顺，居委会无偿为政府奉献，医疗物资充裕，
无人机比天上的鸟还多。
(3) 国家警察的能力不是吹出来的，是有历史传统的。
凡是做不到这三策略点的都是在练葵花宝典，区别是进度。美帝已经走火入魔了，失去
了最佳时机，最佳时机就是武汉封城那会，第二佳时机就是现在，第三佳时机就是丢失
了所以羊之后。不过，看现在床铺与媒体扯皮你就明白了，美帝实际就是练葵花宝典而
已。
想一想你的阿三经理或犹太老板天天忙得焦头烂额的怎么可能把大量精力用在跟你争论
与项目课题具体工作无关的事？老板说跑胶，你说为啥要跑胶，干嘛要跑这种胶，能不
能跑马,老板你到底懂不懂跑胶，你懂跑胶的话为啥前两天观摩电镜去了？ |
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l***o
发帖数: 5337 | 21 1.就是惨到饭没钱吃,电话缴不起电话费已经停机,整天走在路上像僵尸.
2，我最惨的就是现在,一个月损失了50%,我的多麦才郁闷,准备到时候提麦子的现
货,回老家当农民种麦子,我就不相信一粒麦子收获不了十粒麦子,哈哈,到时候我不就由
10手麦子变成100手了。
3.最惨的时候是不想活了,想自杀,而且还好几次.那时候才理解自杀是种解脱呀!
4.鄙人1994年入市，到1999年绿豆关停。总体暴仓8次。自己的，家里的，亲戚的
所有来钱门路几乎断绝。临近2000年时候，满身只有2000快。那时侯我和老婆与别人合
租一套房子，房租150，穿衣吃饭能省则省，一次买了几十斤土豆，天天吃。理发是老
婆给我理，顾不上好看不好看了，理短就行。最辛酸的当时我都跑到未来大厦的卫生间
搜索卫生纸拿回家用！
5.最惨时天天喝稀饭,口袋还剩2元钱....不堪回首啊!
6.心脏差点停止跳动一分钟，好在挺过来了。
7.俺最惨的时候是第一次帮客户做,说亏到百分二十就不做了,结果到了二十的时候
自己不敢做了,那天郁闷出去散心结果天很冷,风很大(天气也配合)没想到客户来出金,
也没有打电话给我,见我不在说我在躲他~~~~~在我... 阅读全帖 |
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D*a
发帖数: 6830 | 22 你切胶纯化留下的是PCR产物这个没问题，但是那个胶亮的地方里面不是只有你想要那
个片段，很多乱七八糟的genome瞎扩的东西被优势产物夹住了只能跟大家一起跑，虽然
你的目标带是绝大部分。一般加了样 的well都比旁边的亮一点，就是因为乱七八糟的
DNA背景。
所以要nested 这样第二对引物只有你的PCR产物可以结合上去，才能纯。而且第二次
PCR出来去跑胶，well那一长条稍微亮点的就完全没了。如果条件受限nested也可以只
有一端。
另外为神马第一个PCR不要跑完，因为普通PCR有错配，如果跑完36个循环，你会稀释很
多，这样你可能正好挑到错配的产物造成你认为KI失败，所以跑个十来个循环富集一下
模版就可以了，这一步不用纯化。
我说得这个方法整个不用纯化胶的kit，需要的是纯化PCR产物的kit。跑胶是为了检验
你的PCR，但是你寄去的是你点样留下来的。
QIAGEN |
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C******y
发帖数: 3249 | 23 屎一筐的直线思维是这样的：
读研，拿蛋白，发CNS
读博后，拿蛋白，发CNS
评青千，拿蛋白，发CNS
评杰青，拿蛋白，发CNS
评院士，拿蛋白，发CNS，发心灵鸡汤做人生导师
晓东王的直线思维是这样的：
读研，跑胶，发CNS
读博后，跑胶，发CNS
评青千，跑胶，发CNS
评杰青，跑胶，发CNS
评院士，跑胶，发CNS，发心灵鸡汤做人生导师 |
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i******s
发帖数: 911 | 24 比赛名称：Superfrog Triathlon (The original Ironman70.3 with navy seals)
比赛地点：Silver strand state beach, Coronado Island, California
比赛日期：2012.9.30
1.2英里游泳／56英里自行车／13.1英里跑步
总共用时 07:01:23
游泳 00:45:33
T1 00:07:48
骑车 03:15:16
T2 00:05:40
跑步 02:47:06
比赛报告，主要供没有太多时间训练，又想完成比赛的朋友参考。
赛前训练
五月份
参加了一个奥运会距离三项比赛,ITU San Diego，之前也有训练，算是体能
储备
六月份
骑车20英里，24英里
七月份
骑车27英里，45英里
跑步5英里，6英里
八月份
骑车56英里
跑步... 阅读全帖 |
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x***u
发帖数: 6421 | 25 寻乌调查
毛泽东
一九三○年五月
我做的调查以这次为最大规模。我过去做过湘潭、湘乡、衡山、醴陵、长沙、永
新、宁冈七个有系统的调查，湖南那五个是大革命时代(一九二七年一月)做的，永新、
宁冈两个是井冈山时代(一九二七年十一月)〔1〕做的。湖南五个放在我的爱人杨开慧
手里，她被杀了，这五个调查大概是损失了。永新、宁冈两个，一九二九年一月红军离
开井冈山时放在山上的一个朋友手里，蒋桂会攻井冈山〔2〕时也损失了。失掉别的任
何东西，我不著急，失掉这些调查(特别是衡山、永新两个)，使我时常念及，永久也不
会忘记。寻乌调查是一九三○年五月四军到寻乌时做的，正是陂头会议〔3〕(二月七日
四军前委与赣西特委的联席会议)之后，汀州会议〔4〕(六月四军前委与闽西特委的联
席会议)之前，关于中国的富农问题我还没有全般了解的时候，同时我对于商业状况是
完全的门外汉，因此下大力来做这个调查。在全部工作上帮助我组织这个调查的，是寻
乌党的书记古柏同志(中学生，破产小地主，曾任小学教师、县革命委员会及县苏维埃
主席，篁乡区人)。在材料上与我以大量供给的，是郭友梅(五十九岁，杂货店主，曾任
县商会长，本城人)、范大... 阅读全帖 |
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s*****V
发帖数: 21731 | 26 转自 http://www.stdaily.com/other/dengxiaoping/chunsongcontentzhang7.htm
原书名《春晖》 ，第五章 重开高考之门 ，标题是我加的
.......
公元1977年10月22日。云南生产建设兵团一师一团二营所在的西双版纳景洪农场。
尽管已是金秋时节，但空气里还是没有多少凉意。
天刚亮，刘伍明就和战友们钻出自己亲手搭建的草屋，奔向橡胶林。割胶，这是他高
中毕业后来到这里两年半以来的主要工作。
虽然已经快到停割的季节了，但属于他任务范围内的200棵橡胶树，每天还得挨个割
过去。在树上划一道口子，树底下放一只碗，奶一样的胶汁就顺着口子流出来，流进碗
里。这个过程比较漫长，一般要3个小时，直到中午温度升高，胶汁停止流淌为止。
中午，大家都纷纷收工下山吃饭了，地里只剩下刘伍明。也不知道怎么回事，他今天
割胶的时候下手有些重，割深了，胶水还在流淌。他就坐在树底下等着。
忽然，营部平时很少使用的高音喇叭响了起来，不断地重复着一句话。刘伍明仔细听
，明明听清楚了，... 阅读全帖 |
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c****t
发帖数: 19049 | 27 ☆─────────────────────────────────────☆
casact (尝尝也) 于 (Fri Jul 22 20:55:29 2011, 美东) 提到:
刘慈欣
《三体》终于能与科幻朋友们见面了，用连载的方式事先谁都没有想到，也是无奈之举
。之前就
题材问题与编辑们仔细商讨过，感觉没有什么问题，但没想到今年是文革三十周年这事
儿，单行
本一时出不了，也只能这样了。
其实这本书不是文革题材的，文革内容在其中只占不到十分之一，但却是一个漂荡在故
事中挥之
不去的精神幽灵。
本书虽不是《球状闪电》的续集，但可以看做那个故事所发生的世界在其后的延续，那
个物理学
家在故事中出现但已不重要，其他的人则永远消失了，林云真的死了，虽然我有时在想
，如果她
活下来，最后是不是这个主人公的样子？
这是一个暂名为《地球往事》的系列的第一部，可以看做一个更长的故事的开始。
这是一个关于背叛的故事，也是一个生存与死亡的故事，有时候，比起生存还是死亡来
，忠诚与
背叛可能更是一个问题。
疯狂与偏执，最终将在人类文明的内部异化出怎样的力量？冷酷的星空将... 阅读全帖 |
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s*****V
发帖数: 21731 | 28 转自 http://www.stdaily.com/other/dengxiaoping/chunsongcontentzhang7.htm
原书名《春晖》 ，第五章 重开高考之门 ，标题是我加的
.......
公元1977年10月22日。云南生产建设兵团一师一团二营所在的西双版纳景洪农场。
尽管已是金秋时节，但空气里还是没有多少凉意。
天刚亮，刘伍明就和战友们钻出自己亲手搭建的草屋，奔向橡胶林。割胶，这是他高
中毕业后来到这里两年半以来的主要工作。
虽然已经快到停割的季节了，但属于他任务范围内的200棵橡胶树，每天还得挨个割
过去。在树上划一道口子，树底下放一只碗，奶一样的胶汁就顺着口子流出来，流进碗
里。这个过程比较漫长，一般要3个小时，直到中午温度升高，胶汁停止流淌为止。
中午，大家都纷纷收工下山吃饭了，地里只剩下刘伍明。也不知道怎么回事，他今天
割胶的时候下手有些重，割深了，胶水还在流淌。他就坐在树底下等着。
忽然，营部平时很少使用的高音喇叭响了起来，不断地重复着一句话。刘伍明仔细听
，明明听清楚了，... 阅读全帖 |
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C********n
发帖数: 6682 | 29 http://www.kfzx.gov.cn/wenzhang_xx.asp?TypeNumber=00110004&ID=1
温州7.23事故谣言大全
作者： 发布人：kmc 发布时间：2011-7-25 来源：进步社会网 点击次数：6092
温州7.23动车追尾脱轨事故谣言大全
温州高铁事故谣言集 http：//jinbushe.org/
目录
编者按
铁道部只培训了高铁司机10天？
温州事故动车组被现场切割掩埋？
铁道部领导到温州喝茅台？
一家医院就死了100多？
铁道部部长被记者群殴，列车填埋时内有尸体？
事故死亡人数上限35人？
牵涉乘客六百人，被隐瞒了三百？
港人游行哀悼在7.23事故遇难者？
吊下动车车厢时有尸体掉下来？
民警在边上看，在救人的是群众？
现场打起来了，到处是哭声枪声？
现场没发现照片上都能看到的车厢乘客？
新上海铁路局局长是曾因事故被免职的安路生？
铁道调度系统现BUG，已拘留两无证程序员？
D3115列车脱节车头只带着第一节车厢就跑了？
编者按
西奴就是要通过小微博段子的扭曲和剪裁，给受众输灌和洗脑如下信息：“德国人专业
牛逼，铁道部是傻逼，中国公铁... 阅读全帖 |
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c****x
发帖数: 6601 | 30 https://user.guancha.cn/main/content?id=35310&page=0
不久前，观察者网科工力量专栏采访了中微半导体董事长尹志尧博士，并刊登了经尹博
士审定的采访全文（点击阅读）。中微半导体是国家集成电路产业基金（大基金）成立
后投资的第一家公司，也是美国《确保美国在半导体产业的长期领导地位》报告中唯一
提到名字的中国公司。2015年，因中微半导体开发的国产等离子体刻蚀设备达到世界先
进水平，美国商务部解除了这类设备持续几十年的出口管制。
当天，尹志尧博士还为我们做了长达近2小时的科普，讲解的内容涉及半导体微观加工
设备、数码产业格局、中国制造业升级战略等许多方面。限于篇幅，此前没有在观察者
网报道中全文刊出。现经仔细编校，并由尹博士本人修改审定，我们在微信公众号刊出
这些内容（全文约15000字），以飨读者。
我下面解释一下，我们做半导体芯片设备也好，还有其他泛半导体微观加工设备也好，
在这个整个产业链处在一个什么位置，解释一下。
我们做的是大型真空的微观加工设备，它是做半导体芯片或其他微观器件加工的。就是
现在大家看到的集成电路，大面积显示屏，太阳... 阅读全帖 |
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c****x
发帖数: 6601 | 31 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: cccpwx (flg政庇小学生), 信区: Military
标 题: 规模大赚钱就是好公司？政府要推动最基础的大国重器
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Aug 31 01:09:58 2018, 美东)
https://user.guancha.cn/main/content?id=35310&page=0
不久前，观察者网科工力量专栏采访了中微半导体董事长尹志尧博士，并刊登了经尹博
士审定的采访全文（点击阅读）。中微半导体是国家集成电路产业基金（大基金）成立
后投资的第一家公司，也是美国《确保美国在半导体产业的长期领导地位》报告中唯一
提到名字的中国公司。2015年，因中微半导体开发的国产等离子体刻蚀设备达到世界先
进水平，美国商务部解除了这类设备持续几十年的出口管制。
当天，尹志尧博士还为我们做了长达近2小时的科普，讲解的内容涉及半导体微观加工
设备、数码产业格局、中国制造业升级战略等许多方面。限于篇幅，此前没有在观察者
网报道中全文刊出。现经仔细编校，并由尹博士本人修改审定，我们在微信公众号刊出
这些内容（... 阅读全帖 |
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y***y
发帖数: 709 | 32 深交3
可是在家里准备晚餐对我来说是一种挑战。为了能做出可以拿出台面的菜，我非常认真
的上网去找了几个菜谱，还请教郑江老婆和以前的同学，精心的策划你的生日晚宴。
你6点钟准时出现在我家里，因为我还不会开车没法自己去买酒，只好把你支出去买。
真是对不起寿星您了，请您来家吃饭，还得让您自个儿出去买酒。
当你把酒买回来的时候，我也准备好可以吃饭了。你看了桌子上的菜说我有贤妻良母的
感觉，不管你是发自内心的说，还是只是随口挑句好听的话来说。
倒上酒后，我举起杯子和你碰杯说，祝你生日快乐。
你说，祝你早日成功嫁人。
我当时的心口好像被人扎一刀似的疼。吃饭的第一句话你就迫不及待的和我划清界限，
难道你怕我缠着你不放吗？亲爱的，你太不了解我的个性和为人了。我是一个骄傲地活
着的人，尊严对于我来说比活着本身还要重要。爱情是相互尊重，相互欣赏，相互疼惜
交错在一起产生的一种难以名状的感情，那是祈求不来的感觉，纠缠或许可以得到感情
，但那肯定不会是我所寻找的爱情。对于我所爱的人，如果他不爱我，我会选择离开，
而不会选择毫无尊严可言的纠缠祈求。
我不会嫁给自己不爱的人。我现在爱的人是你，而你又急切的和我划清... 阅读全帖 |
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s**p
发帖数: 2771 | 33 第一卷 人世间 第806章 冰火交加
”工四面黑夜中的山”全都是白蒙蒙的一片。全都蒙上气透骨的极冻寒霜，乍一看
还以为是冰川利于四周让人不寒而栗！头上更是哗啦啦的降下密密麻麻的冰雹，虽然不
大但却搞的天地间一片朦胧，二十尺外就看不到任何东西了！
而刮过面庞的冷风更暗含一种冻结之气。所到之处几乎滴水成冰，刺的人面耳疼痛
。周遭的普通士兵更是冷的缩成一团一团，脸上的眼泪鼻涕都冻成了细细的冰流！浑身
更是冷的僵硬通红发紫、肿胀起来。一个咋，都手脚不由自主的持续打颤，好似可恰的
耗子挤在一起取暖。手中的兵器更是松松垮垮的挂着，看着就让人恼火：“都给我精神
点儿！这点儿冷都受不了吗？！”
旁边的奥法尖兵骑士忍不住提醒道：“他们身上没有“忍受环境。的法术，受不了
这么冷的天呢。大家冻的连站都站不稳了。您看，这水桶里的水都冻上了厚厚的一层小
估计人都可以站在上面了！这冬天来得也太快了。是不是先避一避”
看到旁边一咋小咋。水桶里果真是冰冻厚如拳头，内外白霜包裹，宛如冰雕雪堆的
“水桶雕塑”伯爵顿时犹豫起来，旁边的“贤婿。法师就口喷唾沫的骂道：“还没打就
像逃避？！你还算... 阅读全帖 |
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r****o
发帖数: 105 | 34 本文献给YL
（十五）AP1的活性测定
第二个模块的实验，DNA affinity chromatography之后我们又跑了一个更精细的
Gel filtration，用的是Amersham卖的Superose 6预装柱子。纯化步骤就只有这么多了。
剩下的就是一些活性测定。无论是sephacryl分出来的组分还是DNA affinity column分出
来的组分，我们都测试了AP-1的活性。方法呢就只有两种，一种是凝胶迁移率变动分析
(EMSA)，另一种是DNA水解酶I 足迹分析 (DNase I footprinting assay)，都可以用来分析
蛋白与特定DNA的结合能力。我过去没做过这两种实验，所以感觉很新奇，做的也格外卖
力，结果也还不错。
Gel Mobility-shift assay 原理很简单，把蛋白质样品和P32标记的寡聚核苷酸探针
一起孵育十几分钟, 然后拿去跑一个低浓度acrylamide胶。如果探针结合上蛋白了，速度
会变慢很多，就会停滞在胶的上段；如果没有结合上，探针就会自由的跑到胶的下段去。
然后把胶拿去做放射自显影就行了。跑胶的装置 |
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m******r
发帖数: 9604 | 35 上周日（11/17/2013）我参加了2013 Ironman Arizona,以12:49:45完赛。这是我的第
三次大铁（全是AZ），下面是比赛报告。
1. 今年的训练
去年大铁之后由于各种原因，差不多半年没练。今年5月初恢复训练时体重长了20几磅
，各项的水平也都回到解放前了。我从自行车开始，前两个月基本上只骑车。6月底开
始跑步，7月底开始游泳。和往年一样，自行车的水平恢复得比较快。升级了头盔，重
做了bike fit，再加上训练，比去年略有提高。跑步由于体重老下不去的原因，到比赛
前还是状态一般。游泳从8月份开始每周参加一次Master Swim Class，在教练的指点下
有不小的进步。今年我用Strava把每一次训练都记录下来，这对每一阶段的总结和规划
都很有帮助。我从8月开始加大训练量，每周训练时间是10-15小时（好吧，和14-20小
时/周的牛人没法比，可是对我来说已经很不容易了）。我注重长距离骑行、跑步以及
骑跑结合的训练。大铁之前比较长的训练有两次century ride（100迈），一次“公制
大铁”（112km ride+26.2km run），10月底参加... 阅读全帖 |
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m******r
发帖数: 9604 | 36 上周日（11/17/2013）我参加了2013 Ironman Arizona,以12:49:45完赛。这是我的第
三次大铁（全是AZ），下面是比赛报告。
1. 今年的训练
去年大铁之后由于各种原因，差不多半年没练。今年5月初恢复训练时体重长了20几磅
，各项的水平也都回到解放前了。我从自行车开始，前两个月基本上只骑车。6月底开
始跑步，7月底开始游泳。和往年一样，自行车的水平恢复得比较快。升级了头盔，重
做了bike fit，再加上训练，比去年略有提高。跑步由于体重老下不去的原因，到比赛
前还是状态一般。游泳从8月份开始每周参加一次Master Swim Class，在教练的指点下
有不小的进步。今年我用Strava把每一次训练都记录下来，这对每一阶段的总结和规划
都很有帮助。我从8月开始加大训练量，每周训练时间是10-15小时（好吧，和14-20小
时/周的牛人没法比，可是对我来说已经很不容易了）。我注重长距离骑行、跑步以及
骑跑结合的训练。大铁之前比较长的训练有两次century ride（100迈），一次“公制
大铁”（112km ride+26.2km run），10月底参加... 阅读全帖 |
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C******r
发帖数: 790 | 37 首半马跑完3天了，趁着忘却的救主还未降临，写个记录留个脚印在跑版。
去年春天从零开始跑步，七个月后参加了local摇啊摇首个比赛：10km。心率很高，赛
后把自己吓一跳。这一年堆了大约1400迈跑量，心率也有所下降。
然而天公不作美，提前天气预报就有预警周末本地区会有几英寸的强降雨，从周五持续
到周一，给比赛是否能如期进行蒙上阴影。周五下午去拿号码包时还好，只有断续的小
雨，到了晚上就变成彻夜不停的大雨。所幸周六上午的10k比赛在雨中如期进行，kids
的比赛被取消。
周六一天都在不停的查天气预报中度过。中午还是冒雨去buffet店填充了碳水，傍晚雨
歇的时候去买了雨衣，也准备了垃圾袋。可能buffet的酸辣汤有点咸，晚上喝了两瓶冰
茶，搞得入夜睡不着还总是如厕。差不多12点多躺下，2点多才睡着，3点多就醒了，醒
了就查天气：发枪前后都降水概率100%，不过官网没有取消比赛的通知；接着睡，到4
点45闹铃叫醒，起来吃了袋泡面和2个香蕉，腾空。因为官网说6点封路，所以大概5：
20开车出发，不到5：40在比赛区附近停好车，就在车里待着，跟早上要碰面的跑友们
保持联系。因为停车场离起点和终... 阅读全帖 |
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m******r
发帖数: 9604 | 38 上周日（11/17/2013）我参加了2013 Ironman Arizona,以12:49:45完赛。这是我的第
三次大铁（全是AZ），下面是比赛报告。
1. 今年的训练
去年大铁之后由于各种原因，差不多半年没练。今年5月初恢复训练时体重长了20几磅
，各项的水平也都回到解放前了。我从自行车开始，前两个月基本上只骑车。6月底开
始跑步，7月底开始游泳。和往年一样，自行车的水平恢复得比较快。升级了头盔，重
做了bike fit，再加上训练，比去年略有提高。跑步由于体重老下不去的原因，到比赛
前还是状态一般。游泳从8月份开始每周参加一次Master Swim Class，在教练的指点下
有不小的进步。今年我用Strava把每一次训练都记录下来，这对每一阶段的总结和规划
都很有帮助。我从8月开始加大训练量，每周训练时间是10-15小时（好吧，和14-20小
时/周的牛人没法比，可是对我来说已经很不容易了）。我注重长距离骑行、跑步以及
骑跑结合的训练。大铁之前比较长的训练有两次century ride（100迈），一次“公制
大铁”（112km ride+26.2km run），10月底参加... 阅读全帖 |
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发帖数: 1 | 39 哎，别说跑胶和我师姐了
说起来都是眼泪。
我师姐长得特清纯，对我特好，我特喜欢她。
那天情人节，我学着网上的创意，酶切了一个质粒，跑胶，想跑出一个心形来表达我的
心意。
我估计胶快泡好了，我跟我我师姐说有个特别礼物给她，让她去给我的胶照相就知道了。
结果一会我师姐脸铁青着就回来了，把照片拍在了我桌子上。
我一看，怎么是一个阴茎形状的胶图。
我是百口莫辩啊。
从此以后师姐再也不理我了。
后来她毕业了。
再后来一次学术会议上看到她，还是那么漂亮，那么清纯，旁边站着英俊的丈夫和两个
可爱的小孩。
哎，本来旁边站的该是我啊。
现在我一直怀疑是不是扑克师兄把内切酶给我换掉了。 |
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g********b
发帖数: 8461 | 40 开大众的看看自己车上有没有~~
1 Stripped oil pan bolt thread 油底壳螺纹损坏. 问题现象：油底壳螺丝拧不紧，
滑丝，渗漏。恶心指数：1，维修成本：oil pan $100 labor $100. 要说出了这问题其
实不能怪大众，怪只能怪换机油的人太SB使这么大力气拧螺丝，但是大众非要用这么软
的铝做油底壳，所以也难辞其咎。油底壳螺丝稍微用力大点就会把螺纹搞坏，坏了还只
能换油底壳解决。别的厂家要不用铁油底壳，要不把螺丝口用铁加固一下。很多大众车
机油消耗量大，有的还真不一定是烧的，而是这里漏出去的。有些aftermarket的复合油底
壳，用铝+铁的方式，可以解决这个问题，如果需要换的话可以考虑。
2 engine splash shield引擎下护板. 问题现象：引擎下护板损坏或丢失。恶心指数：
2，维修成本：parts $200, labor $30-50. 大众车底盘本来就低，再加上这么一套就
用几个卡扣固定的脆皮塑料下护板，开大众的人都知道只要稍微跑跑烂路或者蹭下便道
这下护板也就基本报废了。恶心的是别家的下护板都是把引擎下面整个盖上的那样下护
... 阅读全帖 |
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a*****s
发帖数: 838 | 41 用这个stock buffer按照常用的配方来配胶的话，bis-acrylamide的浓度要比平时高10
倍。不知道这个10倍高的浓度是什么原理？另外配出来的胶，颜色瓷白瓷白的（
resolving gel)。硬度没怎么增加，还是软的。就是操作起来不太爽。另外加上正极池
里加了sodium deoxycholate，跑胶的时候有一条白线跟着dye的线在一起。
还有一个问题是，不容易控制跑胶的样品速度。有的lane快，有的lane慢。郁闷。
（这个是invitrogen的tris-glycine胶的配方，用来跑native gel的）
有经验的吗？谢谢~ |
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C*******e
发帖数: 4348 | 42 +1
另外顺便推荐一下bio-rad家的anyKD胶
没有写具体是什么%
但是比4-20%的还好用
大分子量和小分子量的分离的都很好
最关键是30分钟就跑好了
价钱跟别的pre-cast gradient胶也一样
我们实验室现在全都用这个了
说真的比自己配要省很多时间和精力
（配胶凝胶，1小时，跑胶1.5小时 VS 跑胶30分钟） |
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s*******e
发帖数: 1389 | 43 诸位将军们谈谈，为什么纽约到DC，波士顿的高铁建不起来，山东都要重复建设了？
济青高铁规划建设9站点 工期4年社会资本将参建
2014-05-13 10:04:36齐鲁晚报(参与讨论)
12日，记者从山东高速集团获悉，省政府已经明确由山东高速集团控股
的山东铁路建设投资公司牵头组建济青高铁项目法人实体，未来济青高铁将规划建设济
南东、邹平南等9个站点，建设工期为4年。不过高速集团负责人介绍，按照项目进度来
看，今年开工稍有难度。
今年4月28日，国家发改委正式批复《环渤海地区山东省城际轨道交通
网规划(调整)》，这标志着山东拉开了新一轮“三纵三横”快速铁路网建设的序幕，其
中就包括济青高济南至青岛的新建高铁线路长度305公里，设计时速350公里，途经淄博
、潍坊，计划初设9个站点，争取2018年能够建成通车。
其实早在今年2月，省政府就已确定由山东高速集团控股的山东铁路建
设投资有限公司牵头组建济青高铁项目法人实体，项目招商引资和高管招聘工作也已经
全面铺开。
山东高速集团董... 阅读全帖 |
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s******y
发帖数: 17729 | 44 合肥就喜欢搞这种傻逼的事儿，强磁场中学一样跑胶
还有一个中科院核神马研究所，也在合肥，也tmd跑胶，我认识的好几个跑胶的都去那个
核物理研究所跑胶了，去的早的是百人计划
这个傻逼的国家真的是完犊子了 |
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发帖数: 1 | 45 啥是跑胶啊
[在 aixiaoxiaoyu (我爱小小鱼) 的大作中提到：]
:楼主更想表达的是，手里就这些牌，怎么打得更好吧。我们老中文化太内敛，信奉酒
香不怕巷子深，这个确实是短板，需要改进。我去一个小牛的实验室面试，小牛见我脸
急白赤地说了半天摸不着头脑，委婉地把我拒了。不过祸福相依，后来机缘巧合到了现
在大牛的实验lab. 有次小牛来lab膜拜大牛，正好见到我在跑胶，当时就被震撼住了。
后来他lab里面一个老中跟我说，这个小牛很沮丧地说，没想到他（说得是哥）话都说不
:清楚，胶却跑得炉火纯青。然后还感叹说，要是能把跑胶的功力时间匀给学会自我表
达千份之一，也不会给人那样一个印象。
:所以我对楼主的话，感慨最深 |
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s******y
发帖数: 28562 | 46 这个得看我的状态，如果心不在焉的话的确不行，跑出来的胶条带容易散。
其实跑胶的一个关键就是一些细节，首先就是成胶的质量要非常好（这个最重要），上
样前要把胶孔用缓冲液洗一洗，然后上样的时候枪头不能歪着，而且上样要快而且稳（
这个第二关键），然后跑的电压不要太高防止胶体过热。如果能顾及所有细节，那么跑
出来的胶都不会太难看。
但是如果太久不玩这个东西了就会忘记很多细节。 |
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W*********n
发帖数: 775 | 47 蛋白样品有俩问题：
1） 蛋白样品在裂解之后就上凝胶电泳分离了，然后储存在4C 在洗脱液（30%甲醇，
10% 醋酸，60%水）。由于仪器室的质谱机器坏了修了一个月，然后那个操作的老师休
假了一个月，我就去做别的，耽搁下来了，现在已经在那里放了7个月了。继续用这个
胶来做，会不会影响实验结果？ （没有任何霉菌之类产生）。
２）当时跑电泳的胶是自己配的，结果配的时候上面的浓缩胶可能是用的丙烯酰胺的浓
度有些大，结果跑出来的胶在浓缩胶里面有一些分子量大的蛋白（只看见一条比较清晰
的条带，其他的基本看不见）， 但是每个样品的蛋白条带还是清晰的。请问，还能不
能用这个胶来做LC/MS/MS? 我一般把每个样品的一条胶切成10片， 然后每片分别处理
来做质谱。
样品比较珍贵，处理也很麻烦；所以如果不影响实验结果，我想继续用它。但是作质谱
的花费也很大，如果样品不用保证出好的结果，我还是想选择去另外准备一份。
谢谢！ |
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y*******a
发帖数: 303 | 48 我是在一种genomic information未知的植物里做real-time PCR。此植物为四倍体，且
自交不亲和。一般是先根据同源性设计引物扩部分DNA片段， 然后测序再设计real-
time PCR的引物。拿到引物我会先将Wildtype plant的cDNA用普通PCR仪扩增试一下退
火温度并且跑胶检验40个循环后是否条带单一。确定是单一条带了，会进行大量real-
time实验（Biorad-sybr）。这时悲剧就发生了。有如下一些问题：
1. 同一种cDNA sample的3个技术重复，melting curve不同，有时全是单峰，但不重合
，相差很远；有时3个重复里有单峰也有多峰。
2. 不同cDNA sample之间（WT vs. TG 或者stress treatment at different time
points）melting curve不同，在某个sample里很好全是单峰，在另一sample里就乱了。
3. real-time后跑胶，的确很多带。可是之前用普通PCR扩增，相同program，跑胶是一
条带。
自己的分析是：因为是四倍体，又是自交不亲... 阅读全帖 |
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g***j
发帖数: 40861 | 49 我在假鞋之都莆田花4个晚上买了1双最NB的NB鞋(组图)
新闻来源: 每日人物 于 2017-01-23 20:06:22 大字阅读 敬请注意:新闻取自各大新闻
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我是抱着买到一双最NB的NB（New Balance）鞋的念头，在一个温暖如春的南方冬天
的夜晚，摸到安福小区的。
前一个NB是形容词，它是市井对于“优秀”和“顶级”最干脆、最直接的赞美。后
一个NB是名词，它是穿在人们脚上的那双名牌运动鞋的名字。
而安福小区，不过是福建莆田城西，一个由十几栋楼房组成的居民小区。楼层不足
十层，没有装电梯，外墙漆着安分的灰色。
它毫不起眼，却又处处透着魔幻般的诡异。
早先，它所在的地面曾是火葬场，后来被开发成楼盘，因为历史不吉利卖不上价钱
，据说愁坏了开发商。再后来，安福小区摇身变成了安福电商城。
白天的安福电商城
白天的安福，除了两家24小时便利店里昏昏欲睡的服务员，整个小区鲜见人迹。而
在深夜10点后，假鞋让这个总面积80多万平方米的小区，成为莆田晚上最繁华的地段，
没有之一。
一种在当地流传甚广却无法求证的说法是，国内市场上10双假鞋里，有9双从这里
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b***m
发帖数: 2112 | 50 你这个阶段还需要nimbus?我感觉不需要。我的comments：
1）Asics家的gel和adidas家的boost材料差不多，增加缓冲，但是基本不耐穿。我的GT
-2000也就跑了200km的样子，滞重、同时胶底变型严重，退休大半年了。我摸过gel的
原材料，跟泥巴似的软胶。我个人觉得脱离初级阶段的跑者不需要gel或boost材料，原
因：
1.1) 不耐穿、鞋底易变型；
1.2) 贵；
1.3) 最重要的，虽然gel有缓冲效果，但是带来的问题就是无法像硬底鞋那样提供着地
的平衡和稳定；
1.4) 积累足够经验后，靠发力技巧就能提供足够的缓冲，不需要缓冲材料辅助。
2）追求耐穿的话，推荐adidas家的adizero带continental胶底系列。我的一双估计跑
了1500+km，centinental胶层仍然70%完好，仍然感觉舒适。以前前脚掌中间部位磨损
较多、现在追求前脚掌外侧着地，磨损位置又转向外侧，感觉再跑500km也没问题。
3）看看你的脚掌着地方式是否有问题？我现在的理解：
3.1) 正确的着地方式应该是前脚掌外侧（靠近小脚趾的边沿部分）先着地、然后过渡
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