i******0
发帖数: 17 | 1 用retrovirus deliver transgene into NIH3T3 cells. 以前都用一次infection, 然
后就做selection. 蛋白表达不太高. 请问如果我infect 两次, 或者是三次, 会增加蛋
白的表达量吗? 若要这麽做, 每次infection 之间需要做selection 吗?
请高手指教, 谢了. | y**y
发帖数: 36 | 2 一次感染6-12h就可以了，所以如果你以前是O/N，现在可以分成2-4次，应该够了吧
【在 i******0 的大作中提到】
: 用retrovirus deliver transgene into NIH3T3 cells. 以前都用一次infection, 然
: 后就做selection. 蛋白表达不太高. 请问如果我infect 两次, 或者是三次, 会增加蛋
: 白的表达量吗? 若要这麽做, 每次infection 之间需要做selection 吗?
: 请高手指教, 谢了.
| i*********t
发帖数: 78 | 3 多次infection 不如浓缩病毒， 用high MOI 一次infection, 确保每个细胞至少插入
一个copy. | y**y
发帖数: 36 | 4 有些病毒可能不适合浓缩吧
【在 i*********t 的大作中提到】
: 多次infection 不如浓缩病毒， 用high MOI 一次infection, 确保每个细胞至少插入
: 一个copy.
| j*****q
发帖数: 82 | 5 lz如果你能保证second infection插入的copy是在第一次infection的同一个位置，还
是有机会提高protein level的。double transfection有人用来提高protein产量的。 |
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