请教个QPCR的问题 - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 请教个QPCR的问题

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o****t 发帖数: 242	1 我用了GAPDH两段序列作为 housekeeping gene endogenous control，去检测一个 gene的表达正常还是deletion，结果出来一个正常一个deletion。用的是 ΔΔCt的方法，Ct平均值都在21,22左右。我之前一直用的是一对GAPDH primer，这次做的时候想test一下第二对primer。出现这个结果不同的情况之后，我又用第二对GAPDH primer去检测了之前我做的其他case（用第一对GAPDH primer作为endogenous control）比较表达的不同的，结果都和之前的结果一致。请教各位高手，如果你们碰到这样的问题，怎么解决呢？多谢。
l********e 发帖数: 415	2 Gapdh表达并非永远不变这种情况下用点别的基因作normalization就好了
o****t 发帖数: 242	3 多谢回复，那在这种情况下，我是不是应该更相信第一对primer的结果呢？因为我之前的case都是用的第一对primer做的。我倒是可以用其他基因试试看，周一去看看。多谢。但是这样的话，以后岂不是每次都要用两对endogenous control才放心啦？【在 l********e 的大作中提到】 : Gapdh表达并非永远不变这种情况下用点别的基因作normalization就好了

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