s****a 发帖数: 436 | 1 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: sevana (dreamer), 信区: Biology
标 题: 请教大家:为什么量子点容易吸附在磁性微米颗粒上呢?
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Apr 18 03:13:26 2010, 美东)
量子点表面包裹SHCH2CH2COO-,并标记少量DNA, 磁性颗粒表面也是COO-,同样标记少
量DNA, 经过荧光测试,磁性氧化铁颗粒表面非常容易吸附量子点,而且两段DNA并不
会Hybridize。请问牛人,这是为什么呢?如何能消除这种non-specific binding? 不
甚感激。。。 |
r****p 发帖数: 1854 | 2 啥溶剂?啥pH值?
非质子溶剂,COO- 又是质子化形式的话,可能会形成氢键吧?
1。增大pH值
2。用质子化溶剂,或者是加水(能混溶的话),让COOH和水分子形成氢键而不是分子间
氢键。
【在 s****a 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】 : 发信人: sevana (dreamer), 信区: Biology : 标 题: 请教大家:为什么量子点容易吸附在磁性微米颗粒上呢? : 发信站: BBS 未名空间站 (Sun Apr 18 03:13:26 2010, 美东) : 量子点表面包裹SHCH2CH2COO-,并标记少量DNA, 磁性颗粒表面也是COO-,同样标记少 : 量DNA, 经过荧光测试,磁性氧化铁颗粒表面非常容易吸附量子点,而且两段DNA并不 : 会Hybridize。请问牛人,这是为什么呢?如何能消除这种non-specific binding? 不 : 甚感激。。。
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b*******g 发帖数: 1309 | 3 这么短的ligand 不足以完全稳定Nanoparticle,所以容易团聚
看看Nie SM 为什么用很长PEGligand保护就知道了
超声看看,但是不解决本质
【在 s****a 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】 : 发信人: sevana (dreamer), 信区: Biology : 标 题: 请教大家:为什么量子点容易吸附在磁性微米颗粒上呢? : 发信站: BBS 未名空间站 (Sun Apr 18 03:13:26 2010, 美东) : 量子点表面包裹SHCH2CH2COO-,并标记少量DNA, 磁性颗粒表面也是COO-,同样标记少 : 量DNA, 经过荧光测试,磁性氧化铁颗粒表面非常容易吸附量子点,而且两段DNA并不 : 会Hybridize。请问牛人,这是为什么呢?如何能消除这种non-specific binding? 不 : 甚感激。。。
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s****a 发帖数: 436 | 4 多谢回答,我用羧基修饰纳米颗粒,又标记DNA,当然是在水中了, tris buffer, ph7.
5。
【在 r****p 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 啥溶剂?啥pH值? : 非质子溶剂,COO- 又是质子化形式的话,可能会形成氢键吧? : 1。增大pH值 : 2。用质子化溶剂,或者是加水(能混溶的话),让COOH和水分子形成氢键而不是分子间 : 氢键。
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s****a 发帖数: 436 | 5 你说的的对,巯基乙酸确实不足以稳定NPs,在水溶液中没两天就团聚了。因团聚而造
成 non-specific 吸附的问题,我仔细考虑过,但是这个因素应该被排除。
原因是,ZnSe NPs 表面被标记上DNA链或者蛋白后,其稳定性明显增强,可以保持数月
而不会团聚。另外,我的反应体系中有10mM的DTT(二硫醇),大量硫基吸附到ZnSe表
面,更加有效分散NPs。
所以,现在我就郁闷了,现在NPs表面有大量COO- 和OH-,为什么还会吸附在COOH
标记的磁性微米粒子表面呢?
【在 b*******g 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 这么短的ligand 不足以完全稳定Nanoparticle,所以容易团聚 : 看看Nie SM 为什么用很长PEGligand保护就知道了 : 超声看看,但是不解决本质
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b*******g 发帖数: 1309 | 6 ZnSe NPs 表面被标记上DNA链或者蛋白后,其稳定性明显增强 |
s****a 发帖数: 436 | 7 问的好,DTT 对NPs 表面的影响我想过,有几种可能
首先,它可能和巯基乙酸的硫形成二硫键,导致纳米颗粒团聚。
其次,就是您说的,取代表面的配体,de-stabilize QD。
最后,它可能和ZnSe表面裸露的Zn配位,增强纳米颗粒的稳定性。
于是,我在高浓度的NPs中加入DTT,发现胶体颜色稍稍变黄,这应该是ZnS络合物的颜
色(排除第一种)。同时,对比不加DTT,胶体的稳定性增强(排除第二种),所以我
认为是DTT应该在巯基乙酸脱落的位置,和Zn络合,保护NPs导致稳定性增强。
【在 b*******g 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : ZnSe NPs 表面被标记上DNA链或者蛋白后,其稳定性明显增强
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y*******n 发帖数: 127 | 8 我还见过更严重的情况,比如羧基修饰的PS纳米粒子在pH8时还能吸附双链DNA。我猜是
因为纳米粒子表面的羧基密度不够高,虽然能够部分防止纳米粒子团聚,但是其表面还
是有很多疏水的区域,解决不了根本问题。而且羧基上连接的碳链太长的话,也不利于
其电离。纸上谈兵的说,提高纳米粒子表面羧基或者其他带电基团如磺酸基、磷酸基的
密度,肯定会提高其稳定性。比如,在纳米粒子表面长一层带负电或正电的聚合物刷,
将会极大的改善其稳定性,一个明显的例子是Invitrogen的CML latex的稳定性要比起
carboxyl latex要好得多,原因就是前者表面是聚电解质刷子。PEG改性的纳米粒子稳
定性普遍偏差,毕竟电荷排斥才是王道啊。 |
m*******a 发帖数: 245 | 9 应该是氧化铁颗粒包覆不完全,ZnSe表面的羧基和氧化铁表面吸附的结果吧。 |
b*******g 发帖数: 1309 | 10
When DTT is more than a threshold, it will destablize QD, even dissolve your
QD.... try to mix low concentraiton of QD and high concnetration of DTT.
,所以我
this is right, this is call place-exchange,developed by RW Murray for AuNP
synthesis.
保护NPs导致稳定性增强。
when there is only DTT on QD surface, no charge repulse effect anymore? Did
you notice this change? Without charge repulsion, then it may be easier to aggregate.
And one more point, affinity between COOH and Fe is very strong, if your
magnetic
【在 s****a 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 问的好,DTT 对NPs 表面的影响我想过,有几种可能 : 首先,它可能和巯基乙酸的硫形成二硫键,导致纳米颗粒团聚。 : 其次,就是您说的,取代表面的配体,de-stabilize QD。 : 最后,它可能和ZnSe表面裸露的Zn配位,增强纳米颗粒的稳定性。 : 于是,我在高浓度的NPs中加入DTT,发现胶体颜色稍稍变黄,这应该是ZnS络合物的颜 : 色(排除第一种)。同时,对比不加DTT,胶体的稳定性增强(排除第二种),所以我 : 认为是DTT应该在巯基乙酸脱落的位置,和Zn络合,保护NPs导致稳定性增强。
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g*******r 发帖数: 36 | 11 我用mercapto propionic acid修饰的AuNP还是很稳定的啊,不知道你看过george
whiteside的文章没?pH 3-7羧基表面修饰的nanparticle是很容易团聚的,建议pH8以
上。MPA surface pka is ~5.8
第二,你的buffer ionic strength是多少?这个直接影响debye length,这个参数直接
关系到两个particle之间的“安全”距离。
ph7.
【在 s****a 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 多谢回答,我用羧基修饰纳米颗粒,又标记DNA,当然是在水中了, tris buffer, ph7. : 5。
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s****a 发帖数: 436 | 12 非常正确。
在PH7条件下,颗粒确实容易团聚,所以,我加了一些碱。
另外,曾经测试过不同盐离子浓度对NPs稳定性的影响,发现离子浓度越强,颗粒越容
易团聚。
【在 g*******r 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我用mercapto propionic acid修饰的AuNP还是很稳定的啊,不知道你看过george : whiteside的文章没?pH 3-7羧基表面修饰的nanparticle是很容易团聚的,建议pH8以 : 上。MPA surface pka is ~5.8 : 第二,你的buffer ionic strength是多少?这个直接影响debye length,这个参数直接 : 关系到两个particle之间的“安全”距离。 : : ph7.
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s****a 发帖数: 436 | 13 应该是这样的,测试表明,ZnSe-COOH 和 MNP-COOH之间就能有强的吸附。
【在 m*******a 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 应该是氧化铁颗粒包覆不完全,ZnSe表面的羧基和氧化铁表面吸附的结果吧。
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s****a 发帖数: 436 | 14 Thank you. Your suggestion is very helpful.
I agree the strong affinity between Fe2O3 and ZnSe-COOH.
I think I have two options:
1. try B-casein or BSA to block the surface of MNP-COOH.
2. Increase the surface DNA density to prevent the non-specific adsorption.
your
Did
to aggregate.
【在 b*******g 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : : When DTT is more than a threshold, it will destablize QD, even dissolve your : QD.... try to mix low concentraiton of QD and high concnetration of DTT. : ,所以我 : this is right, this is call place-exchange,developed by RW Murray for AuNP : synthesis. : 保护NPs导致稳定性增强。 : when there is only DTT on QD surface, no charge repulse effect anymore? Did : you notice this change? Without charge repulsion, then it may be easier to aggregate. : And one more point, affinity between COOH and Fe is very strong, if your
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s****a 发帖数: 436 | 15 请问,磺酸基或者磷酸基和DNA, protein or virus键合方便么?
【在 y*******n 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png) : 我还见过更严重的情况,比如羧基修饰的PS纳米粒子在pH8时还能吸附双链DNA。我猜是 : 因为纳米粒子表面的羧基密度不够高,虽然能够部分防止纳米粒子团聚,但是其表面还 : 是有很多疏水的区域,解决不了根本问题。而且羧基上连接的碳链太长的话,也不利于 : 其电离。纸上谈兵的说,提高纳米粒子表面羧基或者其他带电基团如磺酸基、磷酸基的 : 密度,肯定会提高其稳定性。比如,在纳米粒子表面长一层带负电或正电的聚合物刷, : 将会极大的改善其稳定性,一个明显的例子是Invitrogen的CML latex的稳定性要比起 : carboxyl latex要好得多,原因就是前者表面是聚电解质刷子。PEG改性的纳米粒子稳 : 定性普遍偏差,毕竟电荷排斥才是王道啊。
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