t**o
发帖数: 840 | 1 ud naked里面自带的眼影刷，超级无敌赞。
eye primer只用ud的了。
睫毛膏只用hr的lash queen waterproof.
眼部卸妆只用倩碧的紫色水油。
快速洗刷水只用sephora的喷喷。
眼线各种用。目前不喜欢pencil，觉得还不如用cream,可以买有角度的eyeliner brush
.当然平时用diorshow的眼线液笔。
遮暇用ysl明彩笔。
腮红nars, 目前有个六色盘挺好的呀。
primer我有makeup forever的紫绿裸色。
smashbox和猪油膏是小颗粒的感觉很好玩。
其他的木有研究，因为平时只化眼妆，其他部位统统不画。 |
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r******t
发帖数: 629 | 2 1。眼妆的刷子三把不够吧？沿线膏是要一个，然后一个短而密的熏染刷，然后还要笔
头型的细节刷，一个梯形刷招呼眼窝，一个大刷子大面积铺底，一个松散的刷子晕染。
由于会用不同颜色，细节刷可能需要多个。
牌子不重要，好用就行。
2。腮红刷推荐nars的，没有比那个更匀更轻淡的刷了。
3。 不能用同一个，影响散粉的透明感。mac187刷粉状粉底不错，ga家blender刷液体
粉底很赞，bb家faceblender我觉得刷散粉更给力。
4。唇刷可以不用，但是和肤色差距大的唇膏还是需要。另外需要一个遮瑕小刷描边。
Eye primer ud家的不错，nars smashbox家的也可，too faced的也有口碑
Face primer 我觉得smashbox hydrating 那个挺好。powder也要，Mac light&truth的水散粉就好
么。 |
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w****p
发帖数: 257 | 3 之前上来问了粉底抹不匀的问题，很受用。好多MM推荐Laura Mercier 的 primer，我
去sephora试了一下，感觉是乳液的质地，不太像以前用的primer的感觉，这个primer
是用在乳液之后再用吗？而且这个好像没有防晒的，那是不是还得摸一层防晒霜？这样
会不会用的层数太多了啊 |
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x******i
发帖数: 14369 | 4 EVERYDAYMINERAL的刷子又便宜又好用。
偶皮肤很敏感，容易发炎啥的，不敢乱用彩妆，都是用矿物类的。不过发现CLARINS的
彩妆很好用，又温和。
eye primer 当然是TOO FACE啦，打完八折后才十四块，呵呵
脸primer推荐两个，一个是LAURA MERCIER ，一个KORRES的，后者更加好用。
。。 |
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p*****g
发帖数: 445 | 5 对新手而言primer plus要好多了
primer 等你对c++有了一定了解以后去看，就会更有意思 |
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A******y
发帖数: 2041 | 7 If you use taqman, it is unlikely you can use the sybr green primer. There
are RT-PCR primer library these days, just use sybr-green and use the primer
from the library. Also, you need to use multiple house keeping genes these
days. |
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E*******2
发帖数: 131 | 8 为什么不行呢？我的之前的目标基因也是用人家用sybr green的primers啊，自己再找
出primer所在的序列设计一个
probe就很好用了啊。
There
primer
these |
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p******d
发帖数: 3737 | 9 这个真的弄糊涂我了，我同意你说random primer对各个RNA的efficiency是不一样的，
可是能保
证GOI和house keeping gene的specific primer就有同样的efficiency吗？序列不同，
efficiency不一样很正常啊，只要是比较的是同样条件下实验组和对照组的差别就可以
了吧？就算
random primer对GOI和house keeping gene的效率不同，最后要比较的还是实验组和对
照组的相
对差别啊。
RNA
specific
efficiency |
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v***a
发帖数: 1242 | 10 要overexpress一个蛋白（full length），在NCBI查它的nucleotide sequence来设计
cloning primer，发现有两个看起来都可信的reference sequence，blast了一下，发
现这两个sequence在CDS区有一部分是相同并连贯的，其它就都不同了。其中sequence
1只是cds，并且是partial cds，没有stop codon；sequence 2是complete cds，包括
非CDS区，好像是由NIH MGC (Mammalian Gene Collection) Project来的，但由
sequence 1衍生出的AA序列却比sequence 2衍生的AA序列还要多50多个AA。
我选择了全长的sequence 2设计primer，一共设计了3对，PCR后都未能得到预期bp的
band（虽然有的PCR出来是single band），我每对primer都挑了最接近预期长度的PCR
product去sequence，但都不是我想要的gene。。。难道是sequence 2本身就有问题么
？（我是挑的非CDS区 |
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v***a
发帖数: 1242 | 11 谢谢。其实我现在的问题就是不知道该如何设计出clone全长coding sequence的primer
，因为sequence 1和sequence 2的cds也不尽相同，而且sequence 1只是partial cds，
无stop codon，而我针对sequence 2设计的primer又总是clone不到我要的gene（其实
我觉得sequence 1可信度较高，所以现在怀疑是不是sequence 2是不确切的）。我现在
想做的就是你的思路，但为难在primer上了。
PCR |
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g***j
发帖数: 40861 | 12 Sorry, I did not explain clearly.
The template is 16 srrna. So it is likely impossible to distinguish them by
length.
The downstream primer now is hitting on thousands sequences in which about
100 sequences are not what I want. I am asking if there is a simple method
that I can blast my upstream primer in these thousand sequences. So I will
know if I can get what I want through the combination of the downstream and
upstream primers. |
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f******e
发帖数: 53 | 13 We found it is hard to get clear and single band using longer primer.
Now we normally design two overlapped PCR primer which each one is less than
50 bp in length.It works very well in my lab.
,
primer
PCR |
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s********8
发帖数: 619 | 14 没看懂这个，是把两个短的primer用PCR合成一个长的primer，再用这个长primer去做
PCR吗？
100 |
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g*****d
发帖数: 27 | 15 所有方法都试过了，hot start, redesign primers, touchdown, low primer
concentration, change all the reagents...
昨天试了最后一种方法，design tailed primers, 再不成我就崩溃了
大家有没有好的建议？ |
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y******8
发帖数: 1764 | 16 Did you try any control primers?
If not confidential, just paste the sequences of your primers.
Hard to believe that any properly designed primers could fail on plasmid DNA. |
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R****n
发帖数: 708 | 17 common primer pair is the sequencing primer pair. Depending on the library
construction, there are some variations. You can imagine that genomic dna is
fragmented in a range of 100-500bp. Only one pair of primer is added to
their 5'and 3' end. |
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s*****7
发帖数: 96 | 18 求助本版的大侠和高手一个问题。小弟我最近遇到一个问题。我设计了一组primer 和
probe 用于TaqMan QPCR. 在RDP上可以查到每一个primer 或者probe的coverage 在我
所要扩增的种属里面。但是，我现在想知道要是我用一套set（two primers and one
probe)在这个种群里的coverage. 这个可能牵涉到miltiple probe overage的问题。
哪位高手以前要是做过这方面的工作，能否指点一下，多谢。 |
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f*********0
发帖数: 861 | 19 primer浓度对ct有很大的影响,最好找一个固定的primer浓度,每次都用同一个primer浓
度. |
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i*********0
发帖数: 915 | 20 cre + beta-actin 的primer，定了好几个batch（MWG)，基本都是spear的带。
今天从隔壁实验室拿了一点他们的cre 和beta-actin的primer，是metabion的，同样的
浓度，同样的enzyme，结果出来很好。
懂行的说一下，效果为什么差这么大？
这些primer都是那种desalt的。 |
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t******k
发帖数: 599 | 21 之前做ChIP-qPCR的primer都是用别人已经发表的，然后今天听人说在不同细胞组织里
面同一个基因的promoter会不一样，所以最好用细胞特异的primer。我之前用的primer
都是别人发表的es细胞里面，但我作的不是es。于是开始对之前自己做的结果开始怀疑
了。。。。。大家有什么建议的么～～～～ |
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D****g
发帖数: 275 | 22 It is true that some genes have alternative promoters for different cells/
tissues, however, the primers for ChIP-qPCR should cover the binding site of
your target transcription factor, therefore you should not worry about your
primers. If you know potential binding site of your target transcription
factor in other potential promoter of your gene, probably you should design
primers to cover those binding sites. |
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m***o
发帖数: 272 | 23 I am using sybr green qPCR,当测试primer时，用1,1:10,1:100,1:1000,1:10000
cDNA dilution.经常会出现这种情况:用所有5个浓度，primer efficiency会140%，如
果用最稀释的3个，efficiency会好些105%。查查是PCR inhibitor的问题。
如果这样的话，这个primer还是可以用的。
我的问题是：是不是应该把cDNA 也要稀释至少100倍才可以得到可信的结果呢？
谢谢！ |
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s*****7
发帖数: 96 | 24 想请教版上有做过Illumina sequencing 的同学，是否有用过Archaeal specific
primer 扩增16S 的经历。最近sequencing 一批样品，通常大家或者paper上用
universal的primer set.但是我比较感兴趣archaeal population, 之前有试过一些自
己的design, 但效果都不好，如果用universal的primer会比较有bias. 如果有谁做过
这方面的研究，能不能告诉我一下，小弟不胜感激。谢谢。（站内发信就行，多谢了） |
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t*******w
发帖数: 107 | 25 以前sanger过plasmids，对于sanger PCR产物没有经验，问个弱智问题
用F和R primer amplify一个gene以后，需要 sanger PCR 产物
这种情况下，能直接使用PCR的primer来 sanger吗？不知道没有5' extra nt会不会影
响sanger reading
如果 不可行的话，sanger primer的design要离5' end 至少多远呢？ |
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G***G
发帖数: 16778 | 26 thank you. I tried the primer blast.
but I couldn't find the parameter to avoid the primer to bind with other
species.
What is the name of the parameter you mentioned to avoid the primer to
amplify?
algorithm |
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s*****7
发帖数: 96 | 27 求助本版的大侠和高手一个问题。小弟我最近遇到一个问题。我设计了一组primer 和
probe 用于TaqMan QPCR. 在RDP上可以查到每一个primer 或者probe的coverage 在我
所要扩增的种属里面。但是，我现在想知道要是我用一套set（two primers and one
probe)在这个种群里的coverage. 这个可能牵涉到miltiple probe overage的问题。
哪位高手以前要是做过这方面的工作，能否指点一下，多谢。 |
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T*****w
发帖数: 802 | 28 【 以下文字转载自 JobHunting 讨论区 】
发信人: tonygump36 (愚亦奇), 信区: JobHunting
标 题: c++书籍下载@MEGAUPLOAD(primer相关，interview exposed, effec
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Mar 22 12:14:32 2010, 美东)
http://www.megaupload.com/?d=M5MOZ4RP
另一个链接:(内容相同，只是防止temporary unavailable的情况)
http://www.megaupload.com/?d=C4MTFU5X
发现好多人求，我就上传了一下。。其实每本书google一下都能找到。希望对大家有用
吧。如果下载或者文件有问题PM我，谢谢
包括：
c++ primer4rd中英文电子书
c++ primer题解
primer c++ example: source code
effective c++ edition 3
more effective c++
Wrox.Programming.Interviews.Exposed.2n |
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k*******d
发帖数: 1340 | 29 plus和primer不是同一批人写的吧
我觉得看primer就够了 |
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b********n
发帖数: 38600 | 30 AngloZionist: Short primer for the newcomers
http://vineyardsaker.blogspot.com/2014/09/anglozionist-short-primer-for-newcomers.html
Why do I speak of "AngloZionists"? I got that question many times in the
past, so I will make a separate post about it to (hopefully) explain this
once and for all.
1) Anglo:
The USA in an Empire. With roughly 1000 overseas bases (depends on how you
count), a undeniably messianic ideology, a bigger defense offense budget
then the rest of the planet combined, 16+ s... 阅读全帖 |
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T****i
发帖数: 15191 | 31 但是这个错误太低级了，任何做过PCR的都应该会设计primer，而且都是有软件设计的
。付费的，免费的都有。看着他们象是手工设计的。也罢了。但是primer拿到了，QPCR
之前或者之后跑个胶validate一下这种常规操作看来也没做。CDC里面都是什么人啊？ |
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l*******g
发帖数: 27064 | 32 不要光看视频，有教程的，记得看过多的有30多步
打磨不用担心多了，你打磨的时候肯定有一部分漆面也会包括进去，所以喷primer也要
覆盖到一部分，不过你一定注意每次不要喷太多，最后喷漆前可能需要等时间久一些，
甚至需要隔天，等primer完全干透，打磨好了再喷漆，最后别忘了上clearcoat |
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s**4
发帖数: 490 | 33 关键字: 美联航 UA Global Primer Upgrade GPU 升舱券 (SWU)
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Apr 11 23:08:01 2014, 美东)
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美联航 UA Global Primer Upgrade GPU 升舱券 (SWU)
可接受的价格(必须明码标价！):385
物品新旧要求:
New
邮寄方式要求:
帐号用完归还
买卖双方谁承担邮寄损失(Required if not code only):
付款方式说明: BOA, Billpay |
|
m*****a
发帖数: 374 | 34 If my reward card upgrade to primer card this year, is it still primer card
the following calendar year? or only for the current calendar year? Thanks! |
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s**4
发帖数: 490 | 35 关键字: 美联航 UA Global Primer Upgrade GPU 升舱券 (SWU)
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Apr 11 23:08:01 2014, 美东)
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付款方式说明: BOA, Billpay |
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G******i
发帖数: 5226 | 37 ☆─────────────────────────────────────☆
fzzh24 (fzz) 于 (Mon Mar 22 00:27:20 2010, 美东) 提到:
http://www.mitbbs.com/article_t1/JobHunting/31540375_0_1.html
请不要再在站内email我（很少check）
c++ primer (4th)
effective c++ (3rd)
more effective c++ (2nd)
中＆英
c++ primer (4th) 答案
中
需要者，请联系下面这些人
f***********[email protected],q******[email protected],l*****[email protected],
y******[email protected],m******[email protected],l*******[email protected],
y********[email protected],k****[email protected],i******[email protected],
k**********[email protected],simeonyu1981@gm |
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h******l
发帖数: 59 | 38 I only found the solution for the " C++ Primer (3th)", but I need the Answer
Book for "C++ Primer (4th).
Who can send me a copy? Thanks a lot.
my email is: y*******[email protected] |
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i*********n
发帖数: 38 | 40 刷的不都是drywall么？
本来是白墙，不用primer吧
本来是深色的话，primer盖不住的。 |
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e********t
发帖数: 9607 | 41 如果你的墙洗的很干净，刷第一遍不管是漆还是primer都费。刷了一层primer后刷漆比
较省漆。 |
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b*****g
发帖数: 83 | 42 抓住装修工人刷新漆之前，没有先刷一层primer，这样是不是就得重新做了呀？因为看
网上说如果不先刷层primer，新的漆以后会很容易就剥落了。是这样吗？谢谢大家。
老漆是semi-gloss的，新漆是flat的，新漆颜色比老漆要深。 |
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e********t
发帖数: 9607 | 43 不是必须的。只有从来没刷过漆的drywall或者木头才必须prime
但我自己刷，一定刷primer，因为有很多时候/地方，光刷漆要很多遍才能掩盖，
primer比漆掩盖效果好而且便宜。 |
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u**i
发帖数: 142 | 44 想要把深颜色的楼梯riser和栏杆刷成白色，刷一遍primer两遍漆好呢，还是两遍
primer一遍漆好？
还有最后要不要上一遍清漆(polyurethane)？ |
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a********a
发帖数: 3082 | 45 新油漆是浅色的话最好用primer，你可以先小范围试一下，不行再上primer |
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y****a
发帖数: 1140 | 46 丁哥可否具体讲一下底漆的作用呢？我刷primer只用了薄薄的一层，是不是错的，是不
是应该用厚厚的primer才对，后悔呀，我已经刷完了呀 |
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d**********0
发帖数: 13081 | 47 Primer 的作用是， 使paint 更牢的附着在物体上。 还有， 就是cover 物体本
身的颜色。
因为 Primer 不需要paint 的外观漂亮要求， 可以使用比较特殊的含料做到上面的
要求。 |
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x**********n
发帖数: 1262 | 48 房子快十年旧了，邻居都粉刷了外墙，我也准备粉刷一下，问了几家报价，差别很大。
从2000到5000。就是包括pressure wash，caulk接缝，刷漆。
问了贵的那家为什么价格高这么多，除了吹嘘他们用好的涂料外，他说他们要有两道工
序：第一遍是spray sealer（不是刷，是spray），等俩天后再进行第二遍刷漆。这样
颜色均匀，持久。
之后又问他到底什么sealer， 他说是 Sealer conditioner and primer.
我网上查了一下，好像primer不是必须，只是用于局部破损的地方修补。是这么回事吗
？一般房子外面只需要刷一层（遍）漆吧？
我的外墙是这种一条一条的类似水泥板的板子（请看网上盗图）。如果选sherwin
williams的牌子（这个牌子是不是比较好？），具体款／类别有什么讲究或者推荐吗？
非常感谢！ |
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d******s
发帖数: 1190 | 49 PRIMER去年年底就过期了，现在想重新弄一个，我的账户显示还差500刀才到PRIMER，
请问现在还可以买收据充账户吗？现在都什么情况？什么价格？谢谢 |
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y********g
发帖数: 3097 | 50 【 以下文字转载自 FleaMarket 讨论区 】
发信人: yonghehong (yonghehong), 信区: FleaMarket
标 题: [求购]Estee Lauder Lash Primer Plus 0.17oz/5ml
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Oct 6 11:07:55 2011, 美东)
我想要的物品:
Estee Lauder Lash Primer Plus 0.17oz/5ml
单张面值:
有,报个价格.
可接受的价格(必须明码标价！):
物品新旧要求:
邮寄方式要求:
买卖双方谁承担邮寄损失(Required if not code only):
付款方式说明:
其他补充说明:
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