L**P
发帖数: 3792 | 1 latex就是所谓water based漆，环保低污染，加州室内漆都只用这种了
底漆你指primer? primer作用是让漆更好粘上墙面，可以选二合一的，甚至都可以不用
primer，代价就是你可能得刷几遍才能盖好墙面，费时间费漆的材料钱，所以还是别偷
懒了，先刷primer吧，primer便宜。尤其是要用浅色的盖过原来深色的漆，或者色系差
别很大的新漆盖过原漆，不刷primer不知道你刷几遍才好看
墙纸揭掉，买包tsp，热水重开了，拿拖把去拖墙，然后干净水拖两边 |
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k**********i
发帖数: 8706 | 3 经过这段时间的研究，问题终于找到了
首先做一下背景说明，我用的是Lake city 308 once fired case
由于是军用/军剩弹，大多数都有primer crimp, 需要用RCBS swager tool去顶一下蛋
壳的屁屁(primer pocket)把crimp去掉
问题在于我搞错了swager的次序：
我是full length sizing之后再整swager装primer的，虽然这样primer seat没有问题
，但是由于swaging die, 软软的铜蛋壳会变形！（虽然目测不容易观察到）
这是一个低级错误。 吸取教训之后, 正确的顺序应该是：
... -> deprime -> clean primer pocket -> swaging （once in the rest of the
case life )-> full length sizing -> seat primer -> ....
总而言之，就是再灌火药和座弹头的最后一步之前，要保证蛋壳尺寸的标准。
改进之后，所有的自装弹都能顺利上膛了。
另外，原帖中的bullet seating d... 阅读全帖 |
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y**b
发帖数: 10166 | 4 抽空一口气把primer第四版看完，累个半死，笔记都写了快200条。
作为primer，这么全这么细，真的不错。
这么说吧，effective c++第二版里面的50条其实都包含在primer里面，
effective c++有空间对每个问题都有一定展开，而primer大部分只能
简单解释一下，但是也非常不错了。
thinking in c++很多专题非常深入了，比如编译器对多态的实现，
vptr/vtable这些东西，解释得实在很清楚。primer作为primer不大可能去做。
有个感觉，如果不是专职程序员，不接触大量的实际开发，对编程语言本身和
设计的理解总还是有限。比如科学计算领域，虽然不少程序是C++开发的，但是
在设计上主动运用C++那些强大而复杂特性的不多见。 |
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m******t
发帖数: 109 | 5 i am going to do mutations. kit and primers are ready. however, still have
questions. please help.
1. i got 2 PAIRS of primers (sense and anti-sense for each pair). when i
read the manual, i found that for the control, they used 3 primers for 3
mutations, one single primer for one mutation. so i am confused now. should
i use pairs of primers or just sense or anti-sense primer?
2 may i use common SOC medium or i have to use NZY+ both for XL10 competent
cells?
any other suggestions are greatly a |
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h********n
发帖数: 4079 | 6 I mean sequencing primer.
when you design primer to sequence sth, you don't need a pair of primers. So
if I design a primer from the head of insertion and go upstream to sequence
the unknown, I only need to know 100 bp sequence. then based on this 100 bp
I can design primer, one primer on transgene and one on upstream, whose
product is cross the insertion starting point, so to distinguish homo vs
hetero.
But I don't know whether the sequencing pcr can be done on genomic DNA.
BTW, when you doubt |
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C*******e
发帖数: 4348 | 7 有个4kb的片段比较难amplify
好不容易折腾得可以P出来了
然后放到TOPO-II里面去测序（blunt end）
5'端好几次都给我奇怪的结果：
amplification序列如果是这样（从PCR的primer开始，测序是在insert位点上下游比较远的地方，
所以能看到back bone）：
5'TTAGGCCGGCC.....
我得到的就是这样：
5'GCCGGCC......
本该是PCR forward primer 5'的四个碱基不见了
直接导致一个限制性酶切位点不完全
primer是IDT定的
从IDT订过可能有上千的primer，从来没有遇到过这样的情况
现在我不知道是primer的问题还是有什么别的原因
版上有人遇到过么？
当然我准备定新的primer看看有没有帮助
不过还是百思不得其解这是怎么回事啊 |
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B******o
发帖数: 496 | 8 最近花了很多时间折腾RACE。无论是3'还是5'都是铩羽而归。
目前的情况是，3'RACE。 Clontech的kit提供的primer实际上就是Oligo dT加一段
specific的RACE primer。整个反应里就RT酶，total RNA，Oligo dT和dNTP。
cDNA产物用gene specific primer A + RACE primer没有任何条带出来。作为control
，用另一个gene specific的primer B和A配对却有条带。说明RT反应没有问题。可是RT
反应要进行，RACE primer conjugated oligo dT也要能work才行啊？
哪位能说说到底什么地方出问题？ 万分感谢 |
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n********k
发帖数: 2818 | 9 shall be an easy job---I would use fusion PCR---less sequencing and always
works...order two overlapping primers with the mutations in the middle, just
make sure there are at least 16-20bp on the 3 primer side. The overlapping
between the two primers (for fusion) should be at least 16-20bp too. Your
primer should be about 6-12bp+CagGcGA+18-20bp about 30-40bp for both primers
. try to keep the amplicons short 100-500bp. Longer is ok but need more
sequencing and also could get more challenging...... 阅读全帖 |
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c********b
发帖数: 363 | 10 I just synthesized one by myself. Mine is 408 bp. I ordered 8 primers (
contains short complementary sequence one after another). The first 4 (
forward, reverse, forward, reverse to cover the first half of the sequence)
primers and the last 4 primers were put into 2 PCRs for annealing and
filling. The PCR products were then put into a new PCR for annealing and
filling. Then used the first forward primer and the last reverse primer for
a regular PCR. Gel purified the product, cloning. One day's j... 阅读全帖 |
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k****n
发帖数: 42 | 11 本人刚开始做CHIP。 现在遇到一情况：虽然我的INPUT各种PRIMERS的CT相似，但是我
的IGG在不同的PRIMERS中CT相差非常大。
实际的数据如下：
negative control primers: Igg DeltaDelta CT: 0.000126; my antibody
DeltaDelta CT: 0.002845.
positive control primers: Igg DeltaDelta CT: 0.00031; my antibody
DeltaDelta CT: 0.055.
my sample primers: Igg DeltaDelta CT: 0.035; my antibody DeltaDelta CT：0.51
我觉得不是PRIMERS的EFFICIENCY的问题，毕竟INPUT的CT很相似。
所以我不知道这个数据是否正常。还有，最后怎么做数据分析？ 也就是要发PAPER的话
，该如何处理这些数据？ 谢谢了！ |
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l**********1
发帖数: 5204 | 12 qPCR mouse tail tissue extraction DNA
pls refer,
>The SM22aCre-ERT2 mice (Kuhbandner et al. 2000) were generously provided by
Robert
Feil (Interfakulta¨res Institut fu¨rBiochemie,Universita¨tTu¨bingen,
Germany). SM22a protein binds actin and contributes to
smooth muscle contractility ( Je and Sohn 2007; Assinder
et al. 2009) and is expressed specifically in adult smooth
muscle cells of the vasculature and viscera. Genotyping
primers used are listed in supporting information,Table S1.
Genotyping ... 阅读全帖 |
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t**********n
发帖数: 283 | 13 交流交流，谢谢。
1.关于standard curve, 我的理解就是确认PCR amplication efficiency,只要你的样
品DNA好的，为什么一定要用实际IP的
样品量（1/20, 1/200, 1/2000 and 1/2000 of ChIP input）standard curve？当然
如果模板浓度太低，amplication curve may be an issue。
我过去的经验是cDNA样品反复冻融会影响amplication efficiency.
此外如果倍数差别很大比如10倍以上的话就没有必要做standard curve，因为即使扩增
效率低也不会影响到最终结果。
我觉得对一对引物做一次就够了。
2 “qPCR本身是有每次
PCR循环的数据的。根据linear range的扩增曲线，是很容易算出primer的efficiency
的（有的软件会自动给出这个值），然后可以根据这个来定量。”
我以前想过机器应该能自动给出这个效率，但从来没见过，楼主能否说出具体的机器或
软件？
关于这个standard curve，我想探讨下。
我们老板，要求我们... 阅读全帖 |
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s******y
发帖数: 28562 | 14 我以前试验过好几种方法，包括我说的那个RNA ligation 的高大上方法，后来发现最
简单最有效的方法就是经典方法：
第一步. 用OligoDT做primer来合成cDNA
我推荐 SuperScript First-Strand Synthesis System
第二步.用基因特异的primer来克隆感兴趣的基因，注意引物要离基因的编码区的
开头(ATG)和结尾(Stop codon)至少有20bp距离（下面我会说原因）。如果基因
的GC含量高，可以用Herculase来做PCR, 不然的话我一般都直接用heat-activated Pfu
turbo.这样非特异带少。
第三步。如果上一步克隆得到的带太多，或者得到一个smear, 那么就再把得到的
产物简单过小柱子纯化后直接用nested primer重新再扩增一次，这样一般都可以
得到一个非常纯的条带。
Nested primer设计的时候必须在上一步用的引物的内侧（这个就是为什么第2步的引物
我告诉你说离开头和结尾有至少20bp距离,就是为了给Nested primer预留地方的）。
primer? |
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f********t
发帖数: 6999 | 15 【 以下文字转载自 JobHunting 讨论区 】
发信人: hanover (Lafayette), 信区: JobHunting
标 题: 生物 PHD 报个转码工的 offer
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Jan 21 21:55:50 2012, 美东)
在版上潜了两三个月，拿了个玛农的哦佛， base十万出头，经验可能不适合面 FLAG
这类公司，我也没来得及投他们，本来打算再练习一阵，结果面了一个就成了。还没有
从，上来发个感想，针对在找工的同学尤其是想转码工的，但是又没有 cs 背景的同学
写一点。
客观背景：
生物来美八年在一个二三流学校挨着了地，其间无休学，无 paper，无实习。 从本科
算起无工作经验， 也没上过 cs 或者是工程学院的课程，出来以后生物算文理，跨院
修课有麻烦 （本科曾有机会修计算机双学位，因为听从师兄师姐建议要学好生物就没
有修，挺后悔的，有 cs 学位无论出国还是找工都要好很多。）
看书：
c++ primer,
clsr 前 1 / 3 不含作业
cracking the code interview 数据结构四章 （算法两... 阅读全帖 |
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h*****r
发帖数: 73 | 16 在版上潜了两三个月，拿了个玛农的哦佛， base十万出头，经验可能不适合面 FLAG
这类公司，我也没来得及投他们，本来打算再练习一阵，结果面了一个就成了。还没有
从，上来发个感想，针对在找工的同学尤其是想转码工的，但是又没有 cs 背景的同学
写一点。
客观背景：
生物来美八年在一个二三流学校挨着了地，其间无休学，无 paper，无实习。 从本科
算起无工作经验， 也没上过 cs 或者是工程学院的课程，出来以后生物算文理，跨院
修课有麻烦 （本科曾有机会修计算机双学位，因为听从师兄师姐建议要学好生物就没
有修，挺后悔的，有 cs 学位无论出国还是找工都要好很多。）
看书：
c++ primer,
clsr 前 1 / 3 不含作业
cracking the code interview 数据结构四章 （算法两章没来得及看）
effective c++ 前 1 / 3，
mitbbs 本版，要学会考古，很多时候我就是搜算法牛人的贴来学，chenpp/quantx/
viisa/lolhaha/ihasleetcode/kirit/guangyi， 还有好几个常驻不常驻的记不住了，
小尾... 阅读全帖 |
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h*****r
发帖数: 73 | 17 在版上潜了两三个月，拿了个玛农的哦佛， base十万出头，经验可能不适合面 FLAG
这类公司，我也没来得及投他们，本来打算再练习一阵，结果面了一个就成了。还没有
从，上来发个感想，针对在找工的同学尤其是想转码工的，但是又没有 cs 背景的同学
写一点。
客观背景：
生物来美八年在一个二三流学校挨着了地，其间无休学，无 paper，无实习。 从本科
算起无工作经验， 也没上过 cs 或者是工程学院的课程，出来以后生物算文理，跨院
修课有麻烦 （本科曾有机会修计算机双学位，因为听从师兄师姐建议要学好生物就没
有修，挺后悔的，有 cs 学位无论出国还是找工都要好很多。）
看书：
c++ primer,
clrs 前 1 / 3 不含作业 (看来真的很外行，连书名都要说错成 clsr =_=!)
cracking the code interview 数据结构四章 （算法两章没来得及看）
effective c++ 前 1 / 3，
mitbbs 本版，要学会考古，很多时候我就是搜算法牛人的贴来学，chenpp/quantx/
viisa/lolhaha/ihasleetcode/kirit... 阅读全帖 |
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f********t
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标 题: 生物 PHD 报个转码工的 offer
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在版上潜了两三个月，拿了个玛农的哦佛， base十万出头，经验可能不适合面 FLAG
这类公司，我也没来得及投他们，本来打算再练习一阵，结果面了一个就成了。还没有
从，上来发个感想，针对在找工的同学尤其是想转码工的，但是又没有 cs 背景的同学
写一点。
客观背景：
生物来美八年在一个二三流学校挨着了地，其间无休学，无 paper，无实习。 从本科
算起无工作经验， 也没上过 cs 或者是工程学院的课程，出来以后生物算文理，跨院
修课有麻烦 （本科曾有机会修计算机双学位，因为听从师兄师姐建议要学好生物就没
有修，挺后悔的，有 cs 学位无论出国还是找工都要好很多。）
看书：
c++ primer,
clsr 前 1 / 3 不含作业
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w******y
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标 题: 生物 PHD 报个转码工的 offer
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看书：
c++ primer,
clsr 前 1 / 3 不含作业
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f********t
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看书：
c++ primer,
clsr 前 1 / 3 不含作业
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r********m
发帖数: 593 | 21 这楼是Lancome
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r********m
发帖数: 593 | 22 这楼贴各种杂牌的东东.
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r********m
发帖数: 593 | 23 接着贴各种杂牌的东东.
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l********3
发帖数: 17249 | 24 化妆应该有些什么步骤：完整护肤+防晒隔离（我一般只防晒）+PRIMER+liquid
foundation（我敏感不用粉底只用TINTED） + compact powder （皮肤状态好不油可以
省略）+ 眼妆 + 修容（脸型好可以省略） +腮红+ highligh +定妆粉。
以上各项根据自己情况省略。。。
隔离霜：我一般不用，CLINIQUE CITYBLOCK SPF25 OR spf40. 这个我不合适，但是有
MM拥着还好。好像还有推荐什么兰芝还是啥的紫色和绿色的隔离，其实MAKE UP
FOREVER等也有，类似PRIMER，可以纠正肤色。如果皮肤偏黄就用紫色，偏红就用绿色
。。。
PRIMER： LORAC aquaprime, 无油，无硅，无防腐，无香。我比较看中这些。或者
rawSKINCARE的BOTANICAL FACE PRIMER，比较滋润点。眼部的，URBAN DECAY的
EYESHADOW BASE。
foundation： 我不用，一般就用，ARCONA REOZONE 40代替，其实就是一有防晒功能的
TINTED。 主要就是有时脸色不好，让它纠正... 阅读全帖 |
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X*****u
发帖数: 401 | 25 原本护肤到化妆的程序是：
爽肤水-->日霜-->妆前打底霜（primer）-->粉底液-->蜜粉
夏天要来了，我原本的primer是有润色的效果而且是有spf15的。可是这
夏天以来，我希望用防晒霜/隔离霜增加SPF指数。我的问题是基本护肤完
吐了防晒霜，需要再涂primer吗？如果涂primer,然后再上妆，这夏天会
不会太厚了？？很困扰现在。。。另外，有什么防晒/隔离霜是可以当做
primer来用，同时具备翻晒，隔离，还有润色的效果呢？？？谢谢~~ |
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G**********e
发帖数: 11693 | 26 啊！吃包子！
拣大家没怎么讨论的推荐，吃包子机率大一些～
卸妆的
眼部卸妆便宜又好的，neutrogena的油水分离款，walmart就有，5，6块钱一瓶。这个
卸眼妆超级好
对于全脸用的这两个非常不错
dhc deep cleansing oil
h2o plus water-activated eye make-up remover
eye primer
urban decay家的eye primer是明星产品，sephora上面review也是相当相当高的，还有
3种选择
http://www.sephora.com/browse/brand_hierarchy.jhtml;jsessionid=
Eyeshadow Primer Potion - Original, $19
These cult-favorite potions dry down instantly to ensure vibrant, crease-
proof eyeshadow that stays in place. Each formula offers a different shade (
ori... 阅读全帖 |
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f********t
发帖数: 6999 | 27 【 以下文字转载自 JobHunting 讨论区 】
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B*****g
发帖数: 34098 | 28 【 以下文字转载自 JobHunting 讨论区 】
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a***e
发帖数: 829 | 29 偶用的是two-step PCR, 把要突变的点设计在一对互补的引物上，最好在中间，第一步用
normal ５' primer+mutant 3'primer以及mutant 5'primer+normal 3'primer分别得到基
因前段和后段的PCR产物，第二步用正常的5' and 3' primers 做引物，以第一步PCR的两
个产物为模板，得到含有突变的全长DNA，再clone到质粒上拿去测序鉴定就行乐。 |
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H***o
发帖数: 533 | 30 1. Check for sequence. Look for RE sites in your primer sequences and run
gel to see pattern, if not cut or less fragments, your current sequence (or
at least at the primer sites) is wrong. If so, no matter how hard you try
PCR, it won't work; -You indicate the RE pattern seems not right, don't bang
your head againt wall about PCR if the primer sequence is not right
2. Double check primers--check your order receipt, are the sequences right?
Are the primers going inward from opposite directions; |
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t****e
发帖数: 25 | 31 【 以下文字转载自 JobHunting 讨论区 】
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t****e
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f********t
发帖数: 6999 | 33 【 以下文字转载自 JobHunting 讨论区 】
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这类公司，我也没来得及投他们，本来打算再练习一阵，结果面了一个就成了。还没有
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写一点。
客观背景：
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m****n
发帖数: 1066 | 34 1.PCR product is about 200bp. PCR product was run on an agarose gel, cut off
from the gel and purified using a Qia quick gel extraction kit from Qiagen
. The elution buffer doesn’t have EDTA.
2.PCR primers were used as sequencing primers.
3.During the first try, some part of the sequence was readable. The
remaining was mixed with NNNN.
4.During the second try, I redid the PCR and gel-purification. All of the
sequences were NNN. The same sequencing contractor was used.
I like to make some change... 阅读全帖 |
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I*****y
发帖数: 6402 | 35 【 以下文字转载自 JobHunting 讨论区 】
发信人: hanover (Lafayette), 信区: JobHunting
标 题: 生物 PHD 报个转码工的 offer
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Jan 21 21:55:50 2012, 美东)
在版上潜了两三个月，拿了个玛农的哦佛， base十万出头，经验可能不适合面 FLAG
这类公司，我也没来得及投他们，本来打算再练习一阵，结果面了一个就成了。还没有
从，上来发个感想，针对在找工的同学尤其是想转码工的，但是又没有 cs 背景的同学
写一点。
客观背景：
生物来美八年在一个二三流学校挨着了地，其间无休学，无 paper，无实习。 从本科
算起无工作经验， 也没上过 cs 或者是工程学院的课程，出来以后生物算文理，跨院
修课有麻烦 （本科曾有机会修计算机双学位，因为听从师兄师姐建议要学好生物就没
有修，挺后悔的，有 cs 学位无论出国还是找工都要好很多。）
看书：
c++ primer,
clrs 前 1 / 3 不含作业 (看来真的很外行，连书名都要说错成 clsr =_=!)
cracking t... 阅读全帖 |
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G*****h
发帖数: 320 | 36 Design several pairs of primers and then run BLAST searches of these primers
against the host genome sequences (and closely related species) if they are
available.
Rule out these primers with high identities, particularly those with
relatively long identical sequences at 3' ends.
Make sure that 3' ends of your primers have at least one base (the more, the
better) that does not match any host genome sequences.
Test your primers using host genome DNA alone to ensure there are no non-
specific ampl... 阅读全帖 |
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u*********1
发帖数: 2518 | 37 需要测某个exon，那么自然在exon的两侧设计primer；而且我故意把primer设计的距离
exon比较远（比如60-70bp），就是希望整个coding区域都可以被sequencing覆盖到。
但毕竟primer不是想在哪里设计就在哪里设计。比如有时候因为序列的关系，我只能在
距离exon边缘比如20bp的地方设计一个primer。而sequencing时候的一个问题就是，刚
开始sequencing的区域的质量是很低的（比如前30bp），是不可用的。这样的话，如果
primer距离exon边缘太近，很可能exon的开头一段序列的测序质量也很低，等于说并不
是整个exon都被high-quality的测序了。。。
但是我们有两个方向，forward and reverse同时测序。所以纵然forward方向的序列很
sloppy，但reverse方向的high-quality序列可以补偿回来。
我就是想问，假设forward方向的序列很垃圾不能用，而reverse方向这个base是高质量
的，而且是reference allele，是不是就ok了，不用管forward序列了？
... 阅读全帖 |
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j**W
发帖数: 89 | 38 You are right about a couple of things.I switch field and learned biology (
not including molecular biology) in English.And I did not make the targeting
vector. I took over the project starting from agouti mouse. Please bear
with me if I could not be clearer. I am sorry about the confusion on the
primer used for sequencing. We did sequencing with both P1 and P2. One came
back with no good sequence at all. From the sequencing result of the other,
it seems to me like P1. The sequencing result cove... 阅读全帖 |
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l***s
发帖数: 841 | 39 SYBR Ct 35肯定就测不准了。一般不要超过33. 只要有RNA表达（哪怕很低），这个都
不应该是个问题。大多数读数都在30以下，很少超过32. Replicate之间误差一般在0.0
-0.2之间。 若Ct读数太高，大多情况下是primer设计的太糟糕，效率低下。每次我用
新primer之前，都要检验一下，确保效率，特异性都没问题。对于没用过的primers，
先跑QC，有问题的primer比例很低，只有10%左右需要重新设计。其实TaqMan对懒人来
说比较合适，因为primer，master mix什么的，条件都已经optimized,直接用就行了。
若经常做qPCR的，SYBR是即实惠又可靠的选择，完全没必要买那么贵的TaqMan assays。 |
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c****1
发帖数: 1095 | 40 关于这个standard curve，我想探讨下。
我们老板，要求我们每次qPCR，对每对primer都要用input的dilution做standard
curve。而且要用定量的input做standard curve （10, 1, 0.1, 0.01 ng/ul）然后
sample的定量就用这个standard curve。我觉得更合理的做法是，应该是根据实际IP的
样品量（1/20, 1/200, 1/2000 and 1/2000 of ChIP input）standard curve。这个问
题，跟他争论了好几次，后来就懒得跟他争了。
另外，至于就是是否需要每次都做standard curve？我觉得其实是没有必要的，甚至用
input做standard curve是完全不需要的。standard curve本身的目的就是为了计算
primer的efficiency，以方便定量。其实，模板的量，也会影响primer的efficiency，
primer对input样品的effficiency不一定跟IP样品的一样。而且，qPCR本身是有每次
PCR循环的数据的。根据li... 阅读全帖 |
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T*****e
发帖数: 247 | 41 最近一段时间似乎质量非常差。所有的结果都是no priming。我的质粒浓度用nanodrop
测过，也根据他们的要求调整了。还是大批大批的no priming。
要知道，primer是在质粒上的universal primer。而且因为怀疑我的primer有问题，是
让genewiz加的primer。他们如果不会加错，这些primer位点又是在life technologies
topo clone试剂盒直接提供的质粒上的，也不会错。那我只能怀疑是genewiz的问题了
。特别是测错的地方大部分都是把G读错。让我怀疑他们的机器最近出了问题。
有没有哪位最近一两周内碰到相似的问题？还是我自己多心了？ |
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T*****e
发帖数: 247 | 42 最近一段时间似乎质量非常差。所有的结果都是no priming。我的质粒浓度用nanodrop
测过，也根据他们的要求调整了。还是大批大批的no priming。
要知道，primer是在质粒上的universal primer。而且因为怀疑我的primer有问题，是
让genewiz加的primer。他们如果不会加错，这些primer位点又是在life technologies
topo clone试剂盒直接提供的质粒上的，也不会错。那我只能怀疑是genewiz的问题了
。特别是测错的地方大部分都是把G读错。让我怀疑他们的机器最近出了问题。
有没有哪位最近一两周内碰到相似的问题？还是我自己多心了？ |
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c*********u
发帖数: 361 | 43 C++ Primer Plus和C++ Primer两回事，C++ Primer Plus是C Primer Plus的姐妹篇。总
体来说，C++ Primer Plus更基础。Effective C++是经典著作了，C++程序员必读
primier
and |
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T*****w
发帖数: 802 | 44 结果还是隐藏的准矿工贴子。。
学math finance的童鞋要两手准备了。
【 以下文字转载自 JobHunting 讨论区 】
发信人: hanover (Lafayette), 信区: JobHunting
标 题: 生物 PHD 报个转码工的 offer
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Jan 21 21:55:50 2012, 美东)
在版上潜了两三个月，拿了个玛农的哦佛， base十万出头，经验可能不适合面 FLAG
这类公司，我也没来得及投他们，本来打算再练习一阵，结果面了一个就成了。还没有
从，上来发个感想，针对在找工的同学尤其是想转码工的，但是又没有 cs 背景的同学
写一点。
客观背景：
生物来美八年在一个二三流学校挨着了地，其间无休学，无 paper，无实习。 从本科
算起无工作经验， 也没上过 cs 或者是工程学院的课程，出来以后生物算文理，跨院
修课有麻烦 （本科曾有机会修计算机双学位，因为听从师兄师姐建议要学好生物就没
有修，挺后悔的，有 cs 学位无论出国还是找工都要好很多。）
看书：
c++ primer,
clrs 前 1 / 3 不含作业 ... 阅读全帖 |
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t********r
发帖数: 4908 | 45 ☆─────────────────────────────────────☆
lailaimom (15个大饺子) 于 (Tue Jun 8 15:58:12 2010, 美东) 提到:
老师用的是创新的Faber Piano Adventure系统 http://pianoadventures.com/ ， 赖赖做了３０分钟的游戏，就回来了。
感觉怎么那么不靠谱呢？这里还有别人在这条什么piano adventures 的贼船上么？
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bhf (bhf) 于 (Tue Jun 8 16:00:27 2010, 美东) 提到:
俺家闺女也是从PA启蒙的...是用primer这一册么？
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lailaimom (15个大饺子) 于 (Tue Jun 8 16:02:38 2010, 美东) 提到:
No. My first piano Adventure, the one b4 primer.
So... 阅读全帖 |
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p**g
发帖数: 4595 | 46 关于eye primer需不需要专门的还是就用脸部的primer 就可以了？
我买bare escentual的prime time primer还挺好使的
顺便买了他家的那个eye primer
可是这个eye primer像一根笔一样拧的。拧来拧去我怎么没觉得有东西出来啊。。不知
是不是坏了。:( |
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s*****r
发帖数: 11545 | 47 俺就是认为两种方向复制同时存在的情况下复制可能更简单高效才问这个问题的，如果
俺能想明白就不存在这个问题鸟。
一套新的激酶以合成一套新的dntp;
聚合酶结构稍加变化；
35顺序rna primer.
好象就这样。
这样可以免除无数的primers, 免除剔去primers， 免除补充剔除primers留下的空间。
: leading/lagging strand的问题只要你从一个方向复制就存在，无论是53还是35
。而5-
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l******2
发帖数: 5522 | 48 前几天不小心擦到了马路牙子， 前面bumper的一小角擦破了点皮。 这个周末打算自己
DIY， 把漆给补上去。 买了砂纸， primer, 油漆， clear coat。
花了九牛二虎之力， 把擦破皮的地方打磨光滑，然后上了一层primer, 可能有点厚，
等了1个小时，准备喷漆。 一喷上去， 好像油漆就把原来已经干的primer给冲刷掉了
， 然后油漆根本不能在塑料bumper上附着。
请问这是为什么？
现在又重新打磨， 上primer。 打算收到大牛建议后再上油漆。 |
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g********b
发帖数: 8461 | 49 一般讲想弄好点用touchup是没戏的，必须用喷的。可以去买那种压力罐装的漆，找个
没风的日子或者在自家车库里喷最好，气温必须高于20度（越高越好），湿度不得大于
60%，准备一罐漆和一罐primer，新车的话你还要准备一罐clear coat，还有若干砂纸
（60号，150号，300号，600号和1500号各3张），如果想方便的话买个砂纸架。primer
有很多种，我推荐filler primer，修补划痕挺不错的。首先把区域洗干净，把轮胎、
灯具等东西用东西cover上防止喷上漆，然后用60和150号砂纸sand down，目的就是把
区域弄平了就行，把目标区域弄得比周围低一丁丁点，不要sand太多不然就要去买腻子
了。。。然后再清洗干净，晾干，一层一层喷primer，每喷一层晾至少半小时，可以用
热风吹吹但是风力不要太大，喷到比周围高然后完全晾干（这个最好晾1-2周，depend
气温和湿度），然后用300和600号砂纸sand平，洗干净晾干然后喷色漆，也是一层一层
，每层之间晾至少1小时。喷完晾2周，然后用1500号sand平，最后clear coat。很麻烦
但是细心点能修到... 阅读全帖 |
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