用表达IGF1的病毒感染293T，WB却检测不到蛋白的表达，是都分泌出去了吗？ - Biology版 - 未名存档

本页内容为未名空间相应帖子的节选和存档，一周内的贴子最多显示50字，超过一周显示500字访问原贴

Biology版 - 用表达IGF1的病毒感染293T，WB却检测不到蛋白的表达，是都分泌出去了吗？

相关主题
● 哪些基因RNA表达变化，蛋白却无明显相应变化？	● 一个基因的transcript水平高，一定是转录活跃造成的吗？
● mRNA expression 有变化，但蛋白没变化，咋办？	● 用qPCR检测mRNA，高1000倍，却看不到蛋白
● 求教Knockdown的问题	● 求教，老鼠基因Q-PCR 引物设计，
● mRNA降解是从5'端开始还是3’端开始还是从中间开始的？	● 有人做过PCR array么？几个小白问题
● Quantification of western blot 的困惑	● 18S rRNA做内参的问题
● 能用real time RT-PCR来比较同一细胞的不同gene的含量吗？	● 求助：promoter transcription regulation
● 比较不同基因在同一和不同细胞系中的表达量————qPCR结果要怎样分析	● shRNA knockdown 实验求助
● 什么基因在内皮不表达，但在血细胞中稳定表达？	● 急问QPCR引物efficiency在不同细胞系怎么不一样？

相关话题的讨论汇总
话题: 17kd话题: igf1话题: 表达话题: 8kd话题: 蛋白

进入Biology版参与讨论

1

(共1页)

m***o 发帖数: 272	1 IGF1 mw 17kd，mature protein 8kd。说检测不到不准确。就是最高的是48h 10moi时可清楚看到17kd，看不到8kd。但是在 48h 5moi时17kd条带很淡。72h时17kd都十分的淡。mature的8kd蛋白都看不到，跑的20 %gel。 Qpcr可检测到mRNA的表达。是蛋白都分泌出去了吗？但是细胞内多少也该有啊？有谁做过分泌蛋白的表达吗？什么看法？
k******t 发帖数: 1498	2 血清里面有没有IGF1？好早以前读过一篇science，很牛的结论，最后发现是因为血清里面的生长因子作怪。 20 【在 m***o 的大作中提到】 : IGF1 mw 17kd，mature protein 8kd。 : 说检测不到不准确。就是最高的是48h 10moi时可清楚看到17kd，看不到8kd。但是在 : 48h 5moi时17kd条带很淡。72h时17kd都十分的淡。mature的8kd蛋白都看不到，跑的20 : %gel。 : Qpcr可检测到mRNA的表达。是蛋白都分泌出去了吗？但是细胞内多少也该有啊？ : 有谁做过分泌蛋白的表达吗？什么看法？
a****d 发帖数: 1919	3 conditional medium
m***o 发帖数: 272	4 可能没表达清楚，现在是想确定这个病毒确实可以表达IGF1，因为已经注射给老鼠，没看到明显的体重变化，所以做细胞确认一下。因为买的病毒，直接就给老鼠了。血清也做wb，什么看不到，也做了老鼠的liver tissue，也是什么都没看到（不论17kd 还是8kd），所以比较疑惑。细胞怎么48小时有表达（只有17kd），72小时反而没了？比较确定实验中没有犯低级错误，比如加的不准什么的。

1

(共1页)

进入Biology版参与讨论

相关主题
● 急问QPCR引物efficiency在不同细胞系怎么不一样？	● Quantification of western blot 的困惑
● 问题请教：如何比较某个受体在不同物种之间表达的差异？	● 能用real time RT-PCR来比较同一细胞的不同gene的含量吗？
● knockdown efficiency 为何microarray和qPCR测出来不同？	● 比较不同基因在同一和不同细胞系中的表达量————qPCR结果要怎样分析
● qPCR 计算问题	● 什么基因在内皮不表达，但在血细胞中稳定表达？
● 哪些基因RNA表达变化，蛋白却无明显相应变化？	● 一个基因的transcript水平高，一定是转录活跃造成的吗？
● mRNA expression 有变化，但蛋白没变化，咋办？	● 用qPCR检测mRNA，高1000倍，却看不到蛋白
● 求教Knockdown的问题	● 求教，老鼠基因Q-PCR 引物设计，
● mRNA降解是从5'端开始还是3’端开始还是从中间开始的？	● 有人做过PCR array么？几个小白问题

相关话题的讨论汇总
话题: 17kd话题: igf1话题: 表达话题: 8kd话题: 蛋白

未名新帖统计// 7月16日

#	版面	帖数(主题数)
-	全站	4871 (796)
1	Military	3777 (569)
2	Stock	341 (51)
3	Joke	117 (17)
4	History	116 (3)
5	Automobile	100 (9)
6	USANews	55 (9)
7	Midlife	45 (1)
8	Headline	41 (41)
9	Dreamer	33 (13)
10	FleaMarket	32 (20)
11	Living	30 (7)

* 这里只显示发帖超过25的版面，努力灌水吧:-)